實驗材料 | 待滅菌培養基 |
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儀器、耗材 | 串聯式過濾器 培養基瓶 蓋子 容器 蠕動泵 硅樹脂管 架子 |
實驗步驟 | 1. 將管(硅樹脂管,與蠕動泵相配,接至濾器接口)與蠕動泵(最好有底部開關)相連。 2. 將上游端插入待過濾的培養基中。 3. 打開過濾器包裝,與蠕動泵出口相連。 4. 將過濾器(帶罩的串聯式過濾器)夾在架子(固定濾器)的合適高度,使收集培養基的瓶子(有刻度的培養基瓶,鋁箔包裹,干熱法滅菌)正好位于過濾器的下方,瓶頸可被蓋住,并且當裝滿的時候可以很容易地將瓶子取出。如果需要,可先用一個無菌培養瓶進行調試,但最后不要用這個瓶子收集無菌的液體。 5. 打開泵,收集約 20 ml 于瓶中用于調試。 6. 取出調試的瓶子(高溫高壓滅菌),蓋上蓋,標記上“1”。 7. 將第一個培養基瓶的鋁箔拿掉,放在過濾鐘罩下。 8. 打開泵。 9. 灌入瓶中至 100 ml。 10. 關閉泵。 11. 將瓶子取出、蓋好、編號,換一個新的無菌培養基瓶。 12. 重復步驟 7~11,在 5 個瓶子中各裝 100 ml,剩余的收集在最后一個瓶子中。 13. 在每個瓶子的上部空間充 5% CO2 氣體。 14. 將鋁箔重新包在蓋子上,包到瓶頸處以保證保存時無塵。 15. 在瓶子上貼標簽,標注日期,簽名。 16. 將裝有 100 ml 培養基的瓶子保存于 4°C 。 17. 將第一個和最后一個瓶子蓋好置于 37°C , 孵育一周。 18. 將培養基存放于 4°C ,無菌檢測完成之前不要使用。如果在檢測樣品中發現污染,則整批培養基要重新過濾或棄去。 |
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