一、材料與設備
大小均勻的蘿卜種子
9cm 培養皿,濾紙,鑷子,搪瓷盤,移液管:5 ml 2支,0.5 ml 1支
藥品
0.5%次氯酸鈉溶液
100pp M 激動素溶液:10.000 M g激動素用少量0.1NHCl溶解(如不溶解,可用水浴鍋加熱),定容至100 ml 。
二、實驗步驟
1.將蘿卜種子消毒后用蒸餾水洗干凈,然后在墊有濕濾紙的搪瓷盤上薄薄地攤開,蓋上蓋,在25℃黑暗中催芽約30小時。催芽過程中應保持搪瓷盤濕潤。
2.從催芽后的每個幼苗上用鑷子取下較小的一片子葉,子葉上一定不能帶有下胚軸。選取大小一致的子葉50片。每10片為一組,分別稱重。
3.取直徑9cm 的培養皿5套,墊上一張與皿底大小一致的濾紙,編號。從1-4按倍比方式分別配成50,5,0.5,0.05pp M 的激動素溶液4.5 ml ,5號加入蒸餾水4.5 ml ,每皿內放入10片子葉,蓋上蓋,然后在25℃的濕潤條件下用熒光燈照射培養三天。
4.將子葉取出,用濾紙吸去其表面的水分,立即用萬分之一天平稱每皿10個子葉的重量。
三、結果
以子葉增重值為縱坐標,激動素濃度對數為橫坐標,畫出激動素濃度與子葉重量的關系曲線。用同樣方法可測出未知樣品中的細胞分裂素含量相當于多少含量的激動素。 展開 |