溶液的澄清度取本品20mg,加水10m1溶解后,溶液應澄清(通則0902第一法)。有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。避光操作。供試品溶液取本品適量,加流動相溶解并定量稀釋制成每1m中約含0.5mg的溶液。
對照溶液精密量取供試品溶液1ml,置100m1量瓶中,用流動相稀釋至刻度,搖勻系統適用性溶液取甲鈷胺對照品約5mg,加1mol/L鹽酸溶液5.0ml,避光放置1小時,立即加人1moL氫氧化鈉溶液5.0ml,搖勻色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(LunaC18色譜柱,4.6mm×250mm,5m或效能相當的色譜柱)以0.03mol/L磷酸二氫鉀溶液(用0.2mol/L氫氧化鈉溶液或磷酸調節pH值至4.5)-乙腈(84:16)為流動相;檢測波長為342nm;進樣體積20l。系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,甲鈷胺峰的保留時間約為13分鐘,甲鈷胺峰與相對保留時間約為1.16的雜質峰之間的分離度應大于3.0。測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注人液相色譜儀,記錄色譜圖至主成分色譜峰保留時間的3倍。
限度供試品溶液的色譜圖中如有雜質峰,單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%),各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的2倍(2.0%)。水分取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過12.0%