電轉化感受態細胞實驗原理
轉化是指質粒DNA或以它為載體構建的重組DNA導入細菌細胞，并使其生物學特性發生可遺傳的變化的過程,利用理化方法誘導細胞，使其處于最適攝取和容納外來DNA的生理狀態。電轉化法是利用瞬間高壓在細胞上打孔，因而需用冰冷的超純水多次洗滌處于對樹生長前期的細胞，以使細胞懸浮液中應含有盡量少的導電離子。
電轉化感受態細胞實驗流程
1.劃單菌落：倒一個普通的無抗性的LA培養皿，利用感受態菌株，劃單菌落，37℃培養約15hrs（推薦時間：第一天8：00am-11：00pm）。
2.接菌：用20ml的半鹽LB培養基接菌，搖菌約11hrs（推薦時間：第一天11：pm-第二天10：00am）。
3.擴大培養：將菌液接入200ml/瓶的半鹽LB培養基中，每瓶2ml（1%體積比），擴大培養細菌約3hr（第二天11：00am-2：30pm），根據不同的感受態菌株，從2.5hr起開始吸1ml菌液測OD值，當OD600值為0.4-0.6之間時，細菌處于指數生長前期。將搖好的菌液放在冰上預冷10min以上（半小時），并不間斷搖勻菌液（期間搖晃數次是菌體溫度均勻）。以下所有操作均在冰上進行
4.搜集菌體：離心機4度預冷。將預冷的菌液倒入4個500ml離心管中，利用天平兩兩配平，4度5000rpm離心12min收集菌體，棄去上清，用滅菌吸水紙擦干瓶口。
5.雙蒸水清洗1次：先加入5ml左右的預冷雙蒸水，用移液器上下吸動將菌體捶打均勻，并將4瓶菌體兩兩合并成為2瓶。每瓶倒入滅菌雙蒸水約400ml，利用天平配平，劇烈震蕩數次以保證混勻，4度4000rpm離心12min收集菌體，棄上清，注意勿將菌體倒出，并用滅菌吸水紙擦干瓶口。
6.10%甘油清洗兩次：重復以上操作，利用預冷的10%的甘油代替滅菌雙蒸水水清洗兩次，并且將兩瓶菌體合并成為一瓶，利用廢棄液體配平離心。
7.分裝：視最后的菌體的體積加入適量10%甘油（清洗過程中菌體損失會導致菌體較少則少加甘油；最后一次離心后棄上清時殘留的液體過多則少加或不加；正常情況下推薦加10%甘油2.5ml）。利用移液器將菌體上下吸動吹打均勻，將菌液轉移到1.5ml或2ml的離心管（冰上）。并分裝至500ul離心管中，30ul/管，放入液氮中冷凍后，于-80度冰箱保存。
電轉化感受態細胞注意事項
1.所有用到物品均用雙蒸水洗滌，配置，并滅菌烘干，在使用之前-20度預冷
2.劃好的單菌落立即使用，勿放入冰箱儲存，以免影響細菌活力。
3.在搖好的菌液放在冰上預冷時需不時搖動菌液。
4.收集菌體之后的所有操作均在冰上進行。
5.棄去上清時，應緩慢操作，注意不要將菌體倒出。