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  • 發布時間:2019-04-06 22:50 原文鏈接: 病原微生物染色實驗_真菌

    病原微生物的種類繁多,包括屬于真核微生物的真菌、厲于原核微生物的細菌(抗酸桿菌)、來自病毒的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等。這些物質的化學成分中,含有不同的黏多糖、酸性蛋白和脂蛋白成分。染色后,通過氧化劑或直接加熱條件下,可使染色劑與物質結合而形成牢固的復合物。

    實驗方法原理

    真菌是常見的致病菌,其成分含有較多的黏多糖和蛋白質,通過氧化劑,能夠促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再與 Schiff 試劑進行結合,生成新的復紅復合物而顯示真菌的存在,常用高碘酸-復紅染色法。

    實驗材料

    石蠟組織切片

    試劑、試劑盒

    二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水高碘酸Schiff 試劑

    儀器、耗材

    滴管

    實驗步驟


    高碘酸氧化劑:高碘酸 0.5 g,蒸餾水 99 ml。


    Schiff 試劑染色液(參見糖原染色液)。


    1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。


    2. 高碘酸氧化劑處理 10 min,流水洗 2 次。


    3. 蒸餾水洗 2 次,Schiff 試劑染色液處理 20 min 左右,15℃ 以下時在濕盒內加入 50℃ 溫水,可加快染色時間。


    4. 浸入自來水洗 2 min,明礬-蘇木精進行復染 10 s。


    5. 無水乙醇脫水,二甲苯透明和中性樹膠封固。

    展開 
    注意事項


    1. 高碘酸氧化劑置冰箱內保存,可用較長時間。


    2. Schiff 試劑染色后,不宜水洗時間較長,以免背景較深。

    其他

    結果:真菌呈紫紅色,背景無色。


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