病原微生物的種類繁多,包括屬于真核微生物的真菌、厲于原核微生物的細菌(抗酸桿菌)、來自病毒的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等。這些物質的化學成分中,含有不同的黏多糖、酸性蛋白和脂蛋白成分。染色后,通過氧化劑或直接加熱條件下,可使染色劑與物質結合而形成牢固的復合物。
| 實驗方法原理 | 真菌是常見的致病菌,其成分含有較多的黏多糖和蛋白質,通過氧化劑,能夠促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再與 Schiff 試劑進行結合,生成新的復紅復合物而顯示真菌的存在,常用高碘酸-復紅染色法。 |
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| 實驗材料 | 石蠟組織切片 |
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| 試劑、試劑盒 | 二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水高碘酸Schiff 試劑 |
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| 儀器、耗材 | 滴管 |
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| 實驗步驟 |
高碘酸氧化劑:高碘酸 0.5 g,蒸餾水 99 ml。
Schiff 試劑染色液(參見糖原染色液)。
1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。
2. 高碘酸氧化劑處理 10 min,流水洗 2 次。
3. 蒸餾水洗 2 次,Schiff 試劑染色液處理 20 min 左右,15℃ 以下時在濕盒內加入 50℃ 溫水,可加快染色時間。
4. 浸入自來水洗 2 min,明礬-蘇木精進行復染 10 s。
5. 無水乙醇脫水,二甲苯透明和中性樹膠封固。 展開 |
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| 注意事項 |
1. 高碘酸氧化劑置冰箱內保存,可用較長時間。
2. Schiff 試劑染色后,不宜水洗時間較長,以免背景較深。 |
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| 其他 | 結果:真菌呈紫紅色,背景無色。 |
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