1. 原代細胞單層培養
原代細胞單層培養法，是指動物（包括脊椎動物和無脊椎動物）的組織自機體取出后，經胰酶或其他細胞分散劑消化處理，得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中，加入細胞生長所必需的營養液，置合適溫度中經一段時間的培養，分散的單個細胞即貼附玻壁，開始分裂增殖并逐步長成均勻致密的單層細胞。
（1）取雞胚：用碘酒棉球消毒氣室端卵殼，再以酒精棉球消毒，然后以無菌鑷子打開氣室端卵殼，除去殼膜，換一把小鑷子取出雞胚胎，置于平皿中。
（2）剪碎，洗滌：先除去雞胚的頭，爪，內臟，用Hank's 液洗一次，然后用小剪刀將雞胚剪成1～2 毫米大小的碎塊，加入Hank's 液約10 毫升，沖洗組織塊，靜置1～2 分鐘，用毛細吸管吸去液體，同上法再洗滌二次，將血細胞充分洗去。
（3）消化：將已洗凈的組織置于三角燒瓶內，加入0.25% 胰酶溶液10～15 毫升，37 ℃水浴30 分鐘，于消化期間應振蕩2～3 次。由于胰酶的作用使大量細胞游離，液體變混濁。
（4）分散細胞：取出消化瓶，以吸管反復沖打組織塊，直至肉眼看不見組織塊，全部成為分散細胞為止。將細胞懸液用四層紗布過濾，濾液經1000 轉/分離心5 分鐘后，吸去上清液，加入營養液5 毫升，制成均勻分散的細胞懸液。
（5）細胞計數：取出0.1 毫升細胞懸液加于小試管中，加入0.9 ml Hank's 液稀釋，混勻后，吸出少量懸液滴入血球計算板，用低倍鏡計數，并按下列公式計算出每毫升細胞數。
每毫升細胞數=（4大格細胞總數/4）× 104 ×稀釋倍數
（6）細胞分裝及培養：按計算所得的細胞數，用培養液將細胞稀釋成100 萬細胞/ ml，接種40 孔聚苯乙烯微量培養板或細胞培養管，40 孔每孔0.l ml（含10 萬細胞），加蓋蓋好，靜置平放于CO2 培養箱中培養，細胞管每管分裝0.7 ml（含70 萬細胞），用膠塞塞緊，靜置斜放使與平面成5°角，置37 ℃溫箱中培養24～48 小時。此時在低倍鏡下可見生長成單層的雞胚成纖維細胞。
2. 病毒接種及病毒對細胞致病變作用（CPE）的觀察
在低倍鏡下，選擇生成致密成單層的細胞培養管或40 孔細胞培養板，吸去培養液；培養管每管0.1 ml（細胞培養板每孔加入0.025 ml）的新城雞瘟病毒液，分別置37 ℃溫箱或CO2培養箱中使病毒吸附30 分鐘，然后吸除病毒接種物，加入維持液，每管0.7 ml 或每孔0.2 ml，（含1% 小牛血清的0.5% 水解乳蛋白Hank\s 液，其他成分同營養液）置37 ℃培養。每天取出，低倍鏡下觀察有無細胞病變出現（細胞變圓，堆積及脫落）。注意要與不接種病毒的細胞對照作比較。
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