石蠟切片免疫熒光TUNEL和NEUN雙標染色
曾經作過腦組織的TUNEL,也指導過別人做心肌的TUNEL,談談我的意見:
蛋白酶K37度30min,好像有點偏長,我是10min。
你是NBT/BICP顯色的話,
這說明你用的是AP系統,而不是HRP
這樣的話就不是用3%H2O2來去除內源性酶的了,(H2O2是去過氧化氫酶的);
你現在要去除的是內源性堿性磷酸酶,要用乙酸或左旋咪唑:
我們用的是乙酸,效果很是不錯,要不你也試試用乙酸吧,
方法:新鮮配置的3%乙酸(pH2.5)孵育(我當時是37℃ 10min)
可以復染:
用核固紅(fast red,也有人叫 快紅)