鑒別
(1)照薄層色譜法(通則0502)試驗。供試品溶液取本品適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含阿米卡星5mg的溶液對照品溶液取阿米卡星對照品適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中約含阿米卡星5mg的溶液。系統適用性溶液取供試品溶液和對照品溶液,等量混合。色譜條件與測定法見卡那霉素項下系統適用性要求系統適用性溶液應顯單一斑點結果判定供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液主斑點的位置和顏色相同。(2)在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時間應與對照品溶液主峰的保留時間一致。(3)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集1079圖)一致。(4)本品的水溶液顯硫酸鹽的鑒別反應(通則0301)以上(1)、(2)兩項可選做一項。
檢查
酸堿度取本品,加水制成每1ml中約含10mg的溶液,依法測定(通則0631),pH值應為6.0~7.5(n=1.8或2.0~4.0(n=2)。溶液的澄清度與顏色取本品5份,各0.30g,分別加水5ml使溶解,溶液應澄清無色;如顯渾濁,與1號濁度標準液(通則0902第一法)比較,均不得更濃;如顯色,與黃色或黃綠色2號標準比色液(通則0901第一法)比較,均不得更深有關物質照高效液相色譜法(通則0512)測定。供試品溶液取本品適量,加流動相A溶解并稀釋制成每1ml中約含阿米卡星5.0mg的溶液對照溶液精密量取供試品溶液適量,用流動相A定量稀釋制成每1ml中約含阿米卡星50g的溶液。系統適用性溶液取阿米卡星對照品適量,加流動相A溶解并稀釋制成每1ml中約含5.0mg的溶液。色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Spu柱,4.6mm×250mm,5m或效能相當的色譜柱);取辛烷磺酸鈉1.8g和無水硫酸鈉20.0g,加pH3.0的0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液,用0.2mol/L磷酸溶液調節pH值至3.0)50ml和水900ml溶解,加乙腈50ml,混勻,作為流動相A;取辛烷磺酸鈉1.8g和無水硫酸鈉20.0g,加pH3.0的0.2mol/L磷酸鹽緩沖液50m和水850ml溶解,加乙腈100ml,混勻,作為流動相B,按下表進行線性梯度洗脫;流速為每分鐘1.3ml;柱溫為40℃;檢測波長為200nm;進樣體積10l時間(分鐘)流動相A(%流動相B(%)10050系統適用性要求系統適用性溶液色譜圖中,阿米卡星峰的保留時間應在20~30分鐘之間(必要時適當調整流動相A和流動相B的比例),阿米卡星峰與雜質B峰(相對保留時間約為0.92)之間的分離度應符合要求測定法精密量取供試品溶液與對照溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。限度供試品溶液色譜圖中如有雜質峰,雜質F(相對保留時間約為0.89)雜質A(相對保留時間約為1.60,必要時用雜質A對照品確認)與雜質H(相對保留時間約為244)均不得大于對照溶液的主峰面積(1.0%),雜質B與雜質E(相對保留時間約為1.41)均不得大于對照溶液主峰面積的0.5倍(0.5%),其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積(1.0%),各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的3倍(3,0%)。卡那霉素照薄層色譜法(通則0502)試驗供試品溶液取本品,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含阿米卡星25mg的溶液。對照品溶液取卡那霉素對照品適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含卡那霉素0.25mg的溶液。 系統適用性溶液取阿米卡星與卡那霉素對照品各適量,加水溶解并稀釋制成每1ml中分別約含阿米卡星25mg與卡那霉素0.75mg的溶液。色譜條件采用硅膠G薄層板,以二氯甲烷-甲醇-濃氨溶液(25:40:30)為展開劑測定法吸取上述三種溶液各51,分別點于同一薄層板上,展開,晾干,噴以0.2%茚三酮的水飽和正丁醇溶液,在100℃加熱數分鐘。系統適用性要求系統適用性溶液中,阿米卡星與卡那霉素斑點應完全分離限度供試品溶液如顯卡那霉素斑點,與對照品溶液的主斑點比較,不得更深(1%)殘留溶劑照殘留溶劑測定法(通則0861第一法)測定。供試品溶液取本品約0.2g,精密稱定,置頂空瓶中,精密加入水5ml使溶解,密封對照品溶液取甲醇、乙醇、丙酮和乙腈各適量,精密稱定,用水定量稀釋制成每1m1中約含甲醇0.12mg、乙醇0.2mg、丙酮0.2mg和乙腈0.016mg的混合溶液,精密量取5ml,置頂空瓶中,密封。色譜條件以6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷(或極性相近)為固定液的毛細管柱為色譜柱;柱溫為40℃;進樣口溫度為140℃;檢測器溫度為250℃;頂空瓶平衡溫度為80℃,平衡時間為30分鐘系統適用性要求對照品溶液色譜圖中,各主峰間的分離度均應符合要求。測定法取供試品溶液與對照品溶液分別頂空進樣,記錄色譜圖限度按外標法以峰面積計算,甲醇、乙醇、丙酮與乙腈的殘留量均應符合規定硫酸鹽取本品約0.25g,精密稱定,加水100ml使溶解,用濃氨溶液調節pH值至11,精密加氯化鋇滴定液0.1mol/L)10ml及酞紫指示液5滴,用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定,注意保持滴定過程中的pH值為11,滴定至紫色開始消褪,加乙醇50ml,繼續滴定至紫藍色消失并將滴定的結果用空白試驗校正,每1m1氯化鋇滴定液(0.1mol/L)相當于9.606mg硫酸鹽(SO4)。本品含硫酸鹽按干燥品計算應為21.0%~24.0%(n=1.8)或22.8%~26.0%(n=2)。干燥失重取本品,以五氧化二磷為干燥劑,在110℃減壓干燥3小時,減失重量不得過13.0%(通則0831)可見異物取本品5份,每份為制劑最大規格量,加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0904),應符合規定。(供無菌分裝用)不溶性微粒取本品,加微粒檢查用水溶解,依法檢查(通則0903),每1g樣品中,含10m及10pm以上的微粒不 得過6000粒,含25m及25m以上的微粒不得過600粒。(供無菌分裝用)細菌內毒素取本品,依法檢查(通則1143),每1mg阿米卡星中含內毒素的量應小于0.33EU。(供注射用)無菌取本品,用適宜溶劑溶解并稀釋后,經薄膜過濾法處理,依法檢查(通則1101),應符合規定。(供無菌分裝用)