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  • 發布時間:2019-04-11 18:16 原文鏈接: 碳酸復紅(BasicFuchsin)顯示X染色質法

    實驗方法原理在間期細胞核中,女性X染色質和男性Y染色質均可用特殊染色法顯示出來。

    性的兩個X染色體中的一個,在間期時的染色質呈異固縮(Heteropyconosis),呈深染的小體稱Barr氏體。Barr氏體位于間期細胞核內面,呈三角形或半月形小體,易為碳酸復紅或硫堇等染料著色。正常女性Barr氏體陽性,男性為陰性。

    男性Y染色質位于間
    期細胞核近中央部,易為鹽酸阿的平著色,熒光顯微鏡下觀察發較強熒光,呈點狀小體,發光部分系Y染色體異固縮的長臂。初代培養細胞和二倍體細胞株均可觀察到性染色質,傳代細胞系表現不規律。
    試劑、試劑盒

    復紅乙醇石碳酸冰醋酸甲醛

    實驗步驟

    X染色質顯示常用碳酸復紅法和硫堇(Thionine)法。

    一、染色步驟


    1.  細胞

    蓋片培養細胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液內染色5~10 分
    鐘(亦可先固定再染色);如用涂片標本則應待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分鐘后再染色;

     

    2.  分化

    用96 %酒精分化1 分鐘,分化時要不斷搖動,把片子上多余的染料漂洗
    掉;


    3.  脫水

    通過純酒精1 分鐘;


    4.  封片

    二甲苯透明2~3 分鐘,樹膠封固。


    二、結果

    細胞質不著色,細胞核染成紫紅色;陽性Barr氏體附于細胞核膜內面呈
    三角形或半月形小體。



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