由于高電子密度示蹤劑很容易在細胞間隙擴散，并且如果細胞發生損傷，示蹤劑還可進入到細胞中去，因此可利用此方法觀察細胞連接及細胞損傷情況。常用的示蹤劑有鑭、過氧化物酶等。一般采用孵育法，即組織塊在示蹤液中孵育。也有人采用血管灌注法，但基底膜可阻止示蹤劑進入細胞間隙或細胞內，因此一般只是在研究血管通透性改變時才用血管灌注法，大多數情況下用孵育法。
| 實驗材料 | 組織樣品 |
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| 試劑、試劑盒 | NaOH戊二醛硝酸鑭鋨酸-二甲胂酸鈉緩沖液 |
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| 實驗步驟 | 1. 4％ 硝酸鑭配制，PH 7.8，用 NaOH 調，邊加邊攪拌，使溶液呈乳白色。
2. 15～25℃ 條件下，組織用 1％～1.5％ 硝酸鑭、2％～3％ 戊二醛-0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液前固定2～4 h。
3. 1％ 硝酸鑭-二甲胂酸鈉緩沖液漂洗 30 min 左右。
4. 1％ 硝酸鑭、1％ 鋨酸-二甲胂酸鈉緩沖液固定 1～2 h。
5. 包埋、切片同常規。 |
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| 注意事項 |
1. 由于示蹤劑的滲透有限，修塊時需注意，不要太深。
2. 示蹤劑的滲透情況與孵育時的條件有關>如溫度、時間等，因此實際應用還需根據具體情況摸索。
3. 由于鑭有電子染色作用，所以一般情況下不需再染色，當然按照常規方法進行染色也可，對結果并無影響。
4. 組織或細胞在含_液體中的時間不宜過長，否則切片困難。 展開 |
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