實驗材料 蛋白質
試劑、試劑盒 離子交換緩沖液
儀器、耗材 離子交換層析柱梯度混合器電導表
實驗步驟
1. 配制離子交換層析緩沖液，安裝好層析柱，但以離子交換層析緩沖液取代其中的凝膠過濾緩沖液。
2. 用起始梯度的緩沖液溶解含蛋白質混合物的樣品。
3. 棄去柱床上部的大部分緩沖液，并將樣品加在凝膠的頂上。只要樣品的離子強度不超過起始緩沖液的離子強度，上樣體積不限。
4. 讓樣品流入凝膠柱床，并用緩沖液沖冼層析柱的內壁，用吸管往凝膠的頊上 加一層1 cm 高的緩沖液。
5. 連接梯度混合器，分部收集100個級分，每個組份相當于約1%總禪度體積。測各組分的A280以確定蛋白峰的所在，用電導表測離子強度以確定禪度的形狀。