纖維蛋白、紅細胞和血小板是影響血細胞分離的關鍵因素，應預先除去。
一、除去纖維蛋白和紅細胞：
把血液收集在含有抗凝劑的試管里，在試管中加入一定量的玻璃珠，通過搖動可除去纖維蛋白。采用立式大容量冷凍離心機低速離心，使紅細胞形成沉淀，白細胞在紅細胞沉淀上面形成淡黃層，吸出淡黃層可除去紅細胞。
二、除去血小板：
血小板比單核細胞小許多，可采用立式大容量冷凍離心機低速離心除去血小板。若用檸檬酸鹽作為抗凝劑，通過Percoll梯度純化單細胞，再用立式大容量冷凍離心機低速離心除去血小板效果會更好。
