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  • 發布時間:2022-09-30 18:33 原文鏈接: 簡述DNA微陣類型的內容

      基因芯片的制作方式基本可分為以下幾型:

      1、Stanford型

      由美國斯坦福大學開發的cDNA array的制作方法,將預先合成好的核酸探針布放于玻片載體上。 優點:設計較長的探針長度可增加專一性。 缺點:芯片密度較光罩法低,并須有良好的保存設計。

      這種方法又可分為點制法與印制法。

      點制法是小規模生產或實驗室自制的低密度芯片,以機械手臂上帶有毛細作用的細微刻痕的鋼針,將核酸探針溶液點放于玻片或聚酯纖維膜上。成本低廉,適合探針數少或制造需求量不大的狀況。

      印制法是從噴墨打印機的方式變化而來,用加熱氣泡的方式將核酸探針印于玻片上。使用制作良好的噴頭可同時實現高密度、長探針的基因芯片;例如PhalanxJet。

      2、原位合成法

      原位合成(in situ synthesised),是原來用于電子芯片制作的光刻法(Photolithography),轉為核酸序列的合成技術。利用光罩控制反應位置,將核苷酸分子依序列一個一個接上去;可大量生產超高密度的芯片。由于制程與光罩成本等因素,這種方法做出的探針長度約在25-mer以下;因此同一個基因需要多個探針對應,以避免誤判。主要生產廠有 Affymetrix、Roche NimbleGen等。

      3、微珠布放法

      Illumina公司有其獨特的微珠陣列,將核酸探針制作于微小顆粒上,再將其布放于特制玻片。

      4、qPCR array

      在96孔或384孔標準PCR盤或384孔微流體盤中,預先合成好即時PCR引子與探針,將檢體注入后以定量PCR方式進行反應與偵測分析。分析量比傳統芯片少,屬于低密度陣列,但兼具準確定量與定性;并且設備與技術門檻低,一般分子生物實驗室即可自行操作。 新的中密度qPCr array:OpenArray是Applied Biosystems(應用生命系統公司,隸屬于Life Technologies集團)產品,在玻片大小的疏水性基板中分為數十個矩陣區域;矩陣內為親水性表面的微孔,有一組預先合成好的引子與探針。現有的規格是每片玻片有12*4 (48)個矩陣區域,每個區域為8*8 (64)孔。預計2012年有新的12K芯片與專用機臺上市。

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