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  • 發布時間:2019-04-06 20:46 原文鏈接: 糖類染色實驗——黏液物質染色

    實驗方法原理在人體和動物體中能夠分泌黏液物質,依其物質中含有的酸基不同,所以分為中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被稱為中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿爾辛藍高碘酸 Shiff 反應(ABPAS)染色方法。
    實驗材料

    石蠟組織切片

    試劑、試劑盒

    阿爾辛藍 8 GS冰醋酸蒸餾水麝香草酚高碘酸乙醇二甲苯中性樹膠堿性復紅鹽酸焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)雙重蒸餾水

    實驗步驟


    Schiff 染色液:堿性復紅 1 g,1mol/L 鹽酸 20 ml,焦亞硫酸鈉(偏重亞硫酸鈉)2 g,雙重蒸餾水 200 ml。先將 200 ml 雙重蒸餾水煮沸,稍有火焰,加入 1 g 堿性復紅,再煮沸 1 min,冷卻至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 鹽酸,待 35℃ 時加入 2 g 焦亞硫酸鈉。室溫中 2 h 之后見稍帶紅色,5 h 之后變為無色液體。棕色瓶內裝好,放入冰箱中保存待用。


    阿爾辛藍染色液:阿爾辛藍 8 GS 1 g,冰醋酸 3 ml,蒸餾水 97 ml。用前過濾,在溶液中加入麝香草酚 2 粒防腐。pH 值為 2.6~3.00 之間。


    1. 石蠟組織切片,常規脫蠟至水。


    2. 蒸餾水浸洗 1 min。


    3. 3% 乙酸液處理 3 min。


    4. 阿爾辛藍染色液染色 30 min,蒸餾水洗 2 次。


    5. 3% 乙酸液處理 1 min,蒸餾水洗 2 次。


    6. 高碘酸氧化 10 min。


    7. 自來水沖洗,蒸餾水浸洗 2 次。


    8. 在 Schiff 染色液中染色 10~20 min(根據室溫可適當延長或縮短時間)。


    9. 自來水浸洗 2 min(不宜在水中停留時間過長,以免背景較深)。


    10. 無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。

    展開 
    注意事項


    1. 阿爾辛藍染色液使用時不能搖動,防止污染組織切片。


    2. 高碘酸氧化液不能存放時間較長,防止失去氧化效果。

    其他

    結果:中性黏液物質呈紅色,酸性黏液物質呈藍色,中性和酸性黏液混合物質呈紫紅色。


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