紫外可見分光光度法檢測維生素類藥物及其制劑含量

 維生素B₁分子中有共軛雙鍵,在紫外-可見區有吸收。pH=2時,維生素B1在246nm處有最大吸收,吸收系數為421。《中國藥典》2010年版采用紫外-可見分光光度法測定維生素B1片及注射液的含量。維生素A分子中有共多烯側鏈,在325～328nm的波長范圍內有最大吸收。

1.維生素B₁片的含量測定方法取本品20片,精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當于維生素B₁25mg),置100ml量瓶中加鹽酸溶液(9→1000)約70ml,振搖15分鐘使維生素B₁溶解,用上述溶劑稀釋至刻度,搖勻,用干燥濾紙濾過,精密量取續濾液5ml,置另一100ml量瓶中,再加上述溶劑稀釋至刻度,搖勻,照紫外-可見分光光度法,在246nm的波長處測定吸光度,按C₁₂H₁₇ClN₄OS·HCl的吸收系數為421計算,即得。本品含維生素B₁(C₁₂H₁₇ClN₄OS·HCl)應為標示量的90.0%-110.0%。

2.維生素B注射液的含量測定方法精密量取本品適量(約相當維生素B₁50mg)置200m量瓶中,加水稀釋至刻度,勻,精密量取5ml,100ml量瓶中,加鹽酸溶液(9→1000)稀釋至刻度,照分光光度法,在246nm的波長處測定吸度,按C₁₂H₁₇ClN₄OS·HCl的吸收系數為421計算,即得。本品含維生素B₁(C₁₂H₁₇ClN₄OS·HCl)應為標示量的93.0%~107.0%。

3.維生素A的含量測定方法(第一法)取供試品適量,精密稱定,加環已烷溶解定量稀釋制成每1m中含9-15U的溶液,照紫外一見分光光度法,測定其收的波長,并在表中所列各波長處測定吸光度,計算各光度與波長328nm處吸光度的比值和波長328處的值。本品含維生素A應為標示量的70%～103.0%。

如果吸收峰波長為326～320mm,且所測得各波長吸光度比值不超過表中規定的±0.02,可用下式計算含量:

每1g供試品中含有的維生素A的單位=×1900

如果吸收峰波長為326～329nm,但所測得的各波長吸光度比值超過表中規定值的±0.02,應按下式求出校正后的吸光度,然后再計算含量:

如果在328nm處的校正吸光度與未校正吸光度相差不超過±3.0%,則不用校正吸光度,仍以未經校正的吸光度計算含量。

如果校正吸光度與未校正吸光度相差為-15%~-3%則以校正吸光度計算含量如果校正吸光度超出未校正吸光度的-15%~-3%或者吸收峰波長不326~329nm,則供試品須按“皂化法”測定。