本文將重點討論Prep150 LC系統用于從紫錐菊提取物等天然產物的提取分離有效成分。系統自帶ChromScope軟件簡單直觀，可快速實現化合物的分離。本文原理同樣適用于帶紫外發色團的任意化合物的分離。
菊苣酸為紫錐菊中主要化合物的一種，它是苯丙素和咖啡酸的衍生物3,4。具有醫療用途，包括上呼吸道感染與癌癥的治療等等。于是，分離出足量的目標化合物以便進行其他實驗研究很有必要，包括地點、生長條件和樣品處理在內的諸多因素，都會影響到菊苣酸的分離提取，通常需要執行多次粗混合物進樣。在本研究中，我們將重點討論能否將Prep150
LC系統用作從紫錐菊提取物中分離菊苣酸的工具。其由ChromScope軟件進行控制，可快速實現化合物的分離提取。本文原理同樣適用帶有紫外發色團的任意化合物的分離。
實驗部分
液相色譜條件
制備級LC系統：配有2545二元梯度模塊，Prep 150 LC系統，Prep Inject手動進樣器模塊，2489紫外可見光檢測器和沃特世餾分收集器III;分析柱：Atlantis T3，5 μm, 4.6 x 50 mm;制備柱：Atlantis T3 OBD Prep，5 μm, 19 x 50 mm;流動相A：0.1%甲酸的水溶液;流動相B：0.1%甲酸的乙腈溶液。
制備級系統的紫外條件
檢測器：2489紫外可見光;波長模式：單一;波長：330 nm;采樣速率：5 pt/s;過濾時間常數： 正常;數據管理：ChromScope軟件。
樣品前處理
將總計5.3 g的紫錐菊粉末有機根分別加入兩個50 mL的離心管內(各含2.66 g與2.64 g紫錐菊粉末)，使用20 mL
70:30的甲醇/水溶液震蕩約3 h進行提取。然后對離心管執行離心操作，取上清液，使用多個13 mm的GHP
Acrodisk注射器過濾器進行過濾。濃縮蒸發去除提取物中的甲醇，直至形成黃褐色膠狀物。將此膠狀物溶于14 mL 95:5的水/乙腈溶液中。
結果與討論
雖然紫錐菊提取物中含有至少四種咖啡酸衍生物，但菊苣酸仍是其中含量最高的一種化合物，菊苣酸在草藥產品中的效用主要源于其免疫增強功能8。在蒸干甲醇前，紫錐菊粗提取
物的分析色譜圖表明菊苣酸是其中含量最高的化合物(圖1A)。使用快速篩選梯度時，粗提取物中的菊苣酸與相鄰譜峰之間能夠實現良好的分離。為進一步提高譜峰的分離度，實驗重
點對梯度進行了研究9，并在分析柱上進行了載樣量研究。如圖1B所示，分析柱可接受的載樣量為35 μL的粗提取物進樣體積。
圖1. A：紫錐菊粗提取物中的菊苣酸。B：4.6×50 mm色譜柱的梯度與載樣量研究。
圖2. 紫錐菊粗提取物中菊苣酸(4)以及一種微量雜質(3)(菊苣酸同分異構體)的制備級分離。
圖3. 查看色譜圖的同時可方便的查看餾分收集信息。
圖4.分離操作后餾分富集溶液的分析。
由于大體積的強溶劑進樣會使制備級色譜圖失真，因此需要利用旋轉蒸發儀將粗提取物中的甲醇蒸干，使粗提取物成為膠狀。將殘余物溶于14 mL 95:5的水/乙腈溶液中。利用ChromScope軟件中集成的Prep Calculator(制備計算器)工具，將流速與進樣體積從分析柱幾何放大至制備柱，所得制備級色譜圖如圖2所示。實驗所用梯度方法將與色譜圖一同顯示，位于進樣信息選項卡中。此外，用戶還可以查看餾分收集信息，無需再搜索試管收集體積(圖3)。Prep 150 LC系統上的多次進樣所得結果顯示出非常出色的重現性，實驗中對復溶紫錐菊提取物共進行了6次制備級進樣。制備所得富集混合物的餾分分析顯示：分離出的產品具有很高的純度(圖4)。
小結
實用可靠的Prep 150 LC系統是合成化學家們的理想選擇，他們更需要方便易用的純化儀器來縮短樣品循環時間。ChromScope是一款直觀的Prep 150 LC系統控制軟件，便于用戶學習與使用，縮短了培訓所需的時間投入。集成的制備計算器工具無需手動計算制備級梯度，
簡化了放大操作并節約了實驗時間。色譜中高度可視化、帶顏色標記的餾分收集帶讓用戶
能夠快速找到分離產物的位置，減少了樣品處理與后處理中出現的錯誤。Prep 150 LC系統使用戶能夠實現化合物的快速分離與純化，提高了工作效率。Prep 150 LC系統適用于從天然產物提取物中以及從含有紫外吸收化合物的任意樣品混合物中分離化合物。