紅酒中八種合成著色劑檢測

樣品組分	結構式
檸檬黃
新紅
莧菜紅
靛藍
胭脂紅
日落黃
誘惑紅
亮藍

　　參照《食品中合成著色劑的測定》(GB/T5009.35-2003)，建立紅酒中的合成著色劑的SPE-HPLC檢測方法。

三.實驗方法

　　3.1實驗試劑

　　l 乙酸;

　　l 甲醇;

　　l 乙酸銨溶液(0.02mol/L)：稱取1.54g乙酸銨，加水溶解并稀釋至1000mL;

　　l 氨水溶液：量取氨水2ml，加水至100mL，混勻;

　　l 甲醇/甲酸(6+4)溶液：量取甲醇60mL，甲酸40mL，混勻;

　　l 檸檬酸溶液：稱取20g檸檬酸，加水至100mL溶解，混勻;

　　l 無水乙醇-氨水溶液-水：量取無水乙醇70mL，氨水溶液20mL、水10mL，混勻;

　　l 水(PH=6.0)：水加檸檬酸溶液調節PH=6.0;

　　l 水(PH=4.0)：水加檸檬酸溶液調節PH=4.0;

　　l 水：超純水

　　l 合成著色劑儲備液：每1.0mL中含檸檬黃、新紅、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃、亮藍各0.5mg，誘惑紅0.1mg的水溶液;

　　l 合成著色劑使用液：上述合成著色劑儲備液逐級稀釋成每1.0mL中含檸檬黃、新紅、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃、亮藍各5μg，誘惑紅1μg的水溶液;

　　3.2.實驗耗材

　　3.3.試樣處理

　　取試樣(某品牌紅酒)20ml,加入合成著色劑混標溶液1.0mL，混勻，用10%氨水調節PH約6.0，將全部試樣經過Cleanert? JAX柱，分別用水(PH=4.0)、甲醇/加酸(6+4)溶液6mL淋洗，再用10mL水淋洗，用乙醇-氨水溶液-水(7+2+1)6ml洗脫，收集洗脫液于50℃水浴蒸發至干，加水定容至1.0mL，經0.45μm濾膜過濾，待測。

　　3.4液相色譜條件

　　色譜柱：Venusil? XBP C18，5μm;4.6*150mm;

　　流動相：A：0.02mol/L的乙酸銨溶液(乙酸調節pH=4);

　　B：甲醇

　　流 速：1.0mL/min;

　　進樣量：20μL;

　　波 長：254nm;

　　梯 度：

　　五、實驗結論

　　實驗結果表明，Cleanert? JAX小柱和Venusil? XBP C18液相色譜柱可以用于紅酒中的合成著色劑的檢測，該方法快速、準確。

　　六、注意事項

　　l 紅酒樣品呈弱酸性，在上樣之前要將其pH值調節至6左右，保證小柱可對合成著色劑有良好地吸附;

　　l 若樣品酒精度過高，建議在上樣前對樣品進行除醇處理;

　　l SPE小柱凈化過程中，要注意對流速的控制，建議控制在1mL/min左右;

　　l 洗脫液氮吹復溶后，應選用水系濾膜過濾，防止因濾膜吸附造成樣品的損失，建議選用Agela Hydrophilic PTFE濾頭。

　　附錄：

圖1 5ppm混標溶液



圖2 5ppm混標過柱1



圖3 5ppm混標過柱2



圖4 紅酒空白圖譜




圖5 5ppm基質加標1



圖6 5ppm基質加標2