線性離子阱多種解離技術對阿德福韋酯雜質譜的全（二）

結果與討論

I. 全掃—Top5 HCD dd MS/MS 與“FISh”

ADP 雜質譜分析流程由兩次連續的LCMS實驗構成。分析目標是為雜質鑒定和結構解析收集盡可能多的信息。第一個 MS 實驗包括全掃描和后續的 Top5 HCD 數據依賴MS/MS 掃描（圖1）。 接下來，數據通過MassFrontier 當中的Fragment Ion Search（碎片離子檢索，FISh）算法進行處理，這是一個新穎的進行雜質檢出及鑒定的方法，主要基于母離子解離模式的比較（圖2a，b）。與母藥擁有相同碎片的成分會被“FISh”識別出來，見圖3。

圖1.阿德福韋酯的質譜總離子流圖

圖2. 用Mass Frontier“FISh”算法檢測出雜質成分

標注：FISh 檢測到的成分

圖3. “FISh”算法檢測出的雜質成分的XIC

II.Trap-HCD/CID MS² 和MS³ 為未知化合物的結構解析提供豐富的碎片信息

進一步的結構信息通過結合母化合物列表、使用Trap-HCD 和CID 解離組合進行MS² 實驗獲得。

當歸一化的碰撞能量水平相同時，Trap-HCD 比 CID 生成的碎片譜圖信息更豐富。Trap-HCD 沒有低質量數歧視效應，見圖4。CID MSn 能夠提供步進的裂解信息，對結構解析非常有價值，見圖5，6。

圖4. 阿德福韋酯在相同的 25%NCE水平下的CID & HCD MS² 譜圖

- 全掃，CID dd MS²（設定母離子列表），然后對前三的MS²碎片離子進行 HCD MS³

- 全掃, CID dd MS² （設定母離子列表），然后對前三的MS²碎片離子進行 CID MS³

- 全掃, HCD dd MS² （設定母離子列表），然后對前三的MS²碎片離子進行 CID MS³

- 全掃, HCD dd MS² （設定母離子列表），然后對前三的MS²碎片離子進行 HCD MS³

圖5. 雜質m/z 558.19的CID與HCD譜圖比對