1. 在用于 Bockman SW28 號轉頭（或與其等同的產品）的 Uitradear 離心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一層 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液，形成 30 ml 的梯度：
1.0 mol/L 蔗糖和 1.5 mol/L 蔗糖溶液中含：
10 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.5)
1 mmol/L EDTA，pH 7.5
2. 小心加入線粒體懸液（總體積 7 ml），60000 g（22000 r/min）離心 20 分鐘。線粒體會在 1 mol/L 和 1.5 mol/L 界面處形成一薄層。
3. 移去樣品層及其與 1.0 mol/L 層的交界。
4. 用一巴斯德吸管輕柔的在 1.5 mol/L 層頂部吸出線粒體。
5. 稀釋蔗糖溶液，17000 g 離心 15 分鐘沉淀線粒體。
6. 用 30 ml 緩沖液洗一次，重懸浮于合適體積的適于后續工作的緩沖液中。 展開 | 