細胞和亞細胞提取物的制備實驗8

新鮮培養的酵母細胞

裂解緩沖液磷酸鹽緩沖液

預冷的玻璃珠

1.在微型離心機上離心 3 mm，以收集細胞。

2.去上清，用 PBS 重懸細胞，再離心 3 min。

3.去上清，估算細胞沉淀的體積，向細胞沉淀中加人 3 倍體積的冰浴裂解緩沖液，懸浮后置于冰上。

4.加入等體積的預冷玻璃珠。

5.劇烈振蕩懸浮液 30s。

6.重復步驟5，并在相差顯微鏡下觀察，直到大部分酵母細胞被裂解。

7.4°C 條件下在小型離心機中離心懸浮液 5 min，

8.小心地倒出上清，并轉移到另一管中，置于冰上備用。