蛋白濃度太低檢測不出來,我該怎么辦?
默克生命科學 默克生命科學 3月4日
近期,有關新型冠狀病毒的研究將「細胞因子」推至大眾面前,他們在阻擊病毒的工作中各司其職:
初級細胞因子(I 型和 III 型干擾素、IL- 1β、IL-18、TNF-α、IL-6 和 IL-33)對抗病毒信號進行快遞響應,奮力阻擊,不斷招兵買馬;
次級細胞因子(IFN-γ、IL-10 等)在繼續病毒清除工作的同時,開啟抑制炎癥,恢復肺功能的篇章。
如果這一切控制的剛剛好,會是抗病毒路上自身免疫系統的強勢反擊。
細胞因子免疫研究的瓶頸
在抗病毒之路上,這些英勇殺敵的細胞因子,一般多為組織細胞(主要為免疫細胞)合成和分泌的小分子多肽或糖蛋白,作用效率極高,在 fg/mL 的極低濃度區間都能發揮重要的生物學作用。
以大名鼎鼎的 IL-17 為例,IL-17 是由活化 T 細胞產生的致炎細胞因子,可以促進 T 細胞的激活和刺激上皮細胞、內皮細胞、成纖維細胞產生多種細胞因子如 IL-6、IL-8、GM-CSF 和 CAM-1,從而導致炎癥的產生。
其家族成員 IL-17A,在健康人的血清/血漿中含量低至 0.3 pg/mL,超過了常規蛋白檢測方法的皮克級定量下限,達到了飛克級水平。無奈,很多研究者對于部分影響深遠又含量極低的細胞因子只能選擇放棄檢測。
圖 1:對于 IFN-γ,IL-17A 等因子,常規 ECL 等檢測方法無法準確測得,研究員最終通過 SMC? 技術解決了這一問題。
(Erenna 為 SMCxPRO? 的一代設備)[1]。
蛋白檢測「飛克級」時代
默克 SMCxPRO? 單分子免疫檢測技術,在傳統的「三明治」抗體夾心反應的基礎上,結合獨特的洗脫步驟設計和ZL的激光單分子檢測技術,實現了飛克級(fg)水平的蛋白準確定量,較常規 ELISA 檢測靈敏度高 1,000 倍。為您的研究帶來前所未有的洞察力,為蛋白標志物的研究提供全新超強動力。
圖 2:默克 SMCxPRO? 單分子免疫檢測原理
創領生物標志物新發現
當蛋白的檢測與差異表達對您的科研發現意義重大,那么選擇一個值得信賴的超高靈敏度檢測平臺將極大程度加速研究進程,確保數據可靠性。日益精準的研究和藥物研發同樣需要平臺具備更為靈敏的靶標檢測與更高通量的樣本檢測能力。
默克 SMC? 技術可實現低豐度蛋白的準確定量,無論是在生物標志物全新價值發現,還是疾病相關生物標記物的發現與應用上已有豐富應用。
心肌肌鈣蛋白 I(cardiac troponin,cTNI)是心肌肌肉收縮的調節蛋白,在心肌損傷時,由心肌細胞釋放到血循環中,因此常用于急性胸痛病人的診斷。對 cTNI 的研究也一直停留在患者檢驗方向。
SMC? 方法上市后,研究人員首次在健康人血液中發現這一因子,通過對對 350 位正常個體進行檢測統計后發現,80% 個體 cTNI 本地水平低于 4 pg/mL。隨后 12 年的臨床追蹤,發現本底表達 cTNl 較高的個體傾向于較高的累積心臟病發病率。通過 cTNI 本底水平檢測可提前 12 年對個體患病率進行有效預測。
圖 3:cTNI 本底表達水平與個體心臟病患病率成正相關[2]。