細胞培養板作為培養細胞的一種常用和重要的工具，形狀、規格、用途多樣。
你是否也為如何選擇適合的培養板而迷茫？
你是否正為如何方便、正確使用培養板而苦惱？
你對如何處理培養板是否也有困惑？
對不同的培養板各有什么妙用你又有何體會？
細胞培養板的選擇
1）細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；
2）培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；
3）根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。
平底和圓底（U型和V型）培養板的區別和選擇
1）貼壁細胞一般用平底培養板。
2）懸浮型細胞的培養一般用V型。
3）U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞 。
4）V型培養板有時用做免疫學血凝集的實驗。
不同型狀的板子自然有不同用途
平底的什么類型的細胞都可用，但當細胞數目較少，如做克隆時，就用96孔平底板。
另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。
至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面﹐當做兩種不同淋巴細胞混合培養時﹐需要二者相互接觸以刺激。因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內，V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種實驗也可用U型板替代(加入細胞后﹐低速離心）。
如果是養細胞的話， 通常是運用平底的， 另外要特別注意材質， 標示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養細胞用的。
圓底的通常是拿來做分析， 化學反應， 或是保存樣品用。因為圓底比較好將液體吸得干凈， 如果用平底的就不好吸了。 不過， 如果你是要測吸光值的話， 一定要買平底的才行。
大部分細胞培養都用平底培養板，便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致，還便于MTT檢測。
圓底培養板主要用于同位素摻入的實驗，需要用細胞收集儀收集細胞的培養，如“混合淋巴細胞培養”等。
問題集錦
問：我看到培養板有4、6、12、24、48、96孔幾種規格 ，但不知道到底什么實驗用哪種規格，請指教。
答：要根據你具體的實驗要求，流式一般用6孔，MTT一般用96孔，細胞爬片一般用24孔等！要具體根據你實驗來定！
問：請問哪位高手知道Terasaki板是什么培養板，與普通細胞培養板有什么區別？謝謝！！
答：Terasaki plate主要是用于晶體學研究，產品設計便于對晶體的觀察與結構分析。
有兩種sitting 和handing drop兩種方法，兩種方法應用產品的外形結構也不同。
材料上選擇crystal class polymer ，特殊的材料有利觀察晶體結構。
細胞培養板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于細胞貼壁生長與伸展。當然還有浮游細胞的生長材料，同時還有low binding surface，有關更多實驗材料上的應用與對材料的選擇。
問：我想測吸光度用酶標儀，用多孔細胞培養板行嗎？請問酶標板 多孔細胞培養板有什么區別？
答：用多空細胞培養板測吸光度肯定可以拉，我們經常用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測。
區別：酶標板一般要比細胞培養板貴，細胞板主要做細胞培養，但也可以用來測蛋白濃度；酶標板包括包被板和反應板，一般不能用做細胞培養，它主要做免疫酶聯反應后的蛋白檢測，它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。
如下是個用酶標板檢測冠狀病毒IgM/IgG抗體例子
【操作步驟】
1．加樣品：將標本稀釋液100ul（或2滴）加到包被板內（預留陰陽性及空白對照2－5孔），將待檢血清用PBS或生理鹽水按1：20稀釋后取10ul加入反應孔內。
2．加對照：加入陰性對照1－3孔，陽性對照1孔，各100ul對照血清。空白對照1孔空置。
3．溫育：將反應板震蕩使樣品混勻后，置37℃溫箱或水浴反應20分鐘。
4．洗板：用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。（1）手洗：將反應板孔內容物傾出，將洗滌液注滿反應孔，放置30秒鐘后用力甩去，如此重復5次后拍干。（2）機洗：5次，每孔注入洗滌液200ul或注滿，停留30秒鐘后吸盡拍干。
5．加酶標工作液：每孔加入100ul（或2滴）酶標工作液，置37℃溫箱反應20分鐘后，洗板5次，洗板操作同步驟4。
6．顯色和終止反應：將底物A、B液各50ul（或1滴）加到反應孔內，37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul（或1滴）混勻終止反應。
【結果判定】
1．酶標儀設定波長450nm，先用空白調零，然后測定各孔OD值；如果選用雙波長測定，不必設置空白對照孔。
2．當陰性對照平均OD值小于0.08，陽性對照（pc）OD值大于0.30時，說明試劑盒有效且實驗操作正確，否則應當重復試驗。
3．臨界值（CUT—OFF VALUE）＝0.15＋陰性對照平均（NC）OD值（當陰性平均OD值小于0.05時，按0.05計算；當陰性平均OD值大于或等于等于0.05時按實際值計算）。
4．標本OD值≤臨界值為陰性，標本OD值>臨界值為陽性。
常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量：不同孔板所加培養液的液面都不宜太深，一般在2-3mm范圍，結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體（氧氣）交換，而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。
細胞培養板的密閉和污染問題
細胞培養板的加樣和操作：
細胞培養板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則，各項操作要保證規范、科學，不對細胞的生長造成額外的影響。這其中最常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態的影響。
問：
96，24孔培養板或培養皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細菌、霉菌等污染物會不會也隨著溜進去呢？
答：
蓋子很松，屬于半開放培養，這樣的目的是透氣（實際上是為了使培養皿外的CO2能夠與培養皿充分交換，維持培養基的pH值）。
凡事有利必有弊，這樣當然增加了污染的可能性。此外這樣還會使培養皿內的液體蒸發，這對于精確定量的藥物來說就顯得值得注意了。所以以下二條措施是必須的a培養箱內空氣必須清潔（定期紫外線照，酒精擦洗，盡量少開關培養箱）b培養箱內的濕度必須始終保持為100%（培養箱內放置無菌蒸餾水的水槽）。
就好像培養皿，也是一個蓋倒扣的容器，也不會污染。主要是因為蓋子“L”型邊緣產生氣流負壓的緣故，灰塵上面才附著有微生物，而氣流攜帶的灰塵是無法通過產生負壓的蓋邊緣的。而透氣作用只是通過空氣的擴散，不會產生氣流，所以只會透氣不會透菌。
問：
使用24孔板，在其中的某些孔中有操作(在超凈臺內)，而其他孔中還有細胞要培養.我很擔心這樣會污染，不知道要注意什么?
答：
在超凈臺內如果操作規范的話應該可以的，我想你可以充分利用培養版的蓋子，盡量只暴露要操作的孔，將其他孔用蓋子蓋起來。
使用前綜合考慮一下，充分使用所有的孔；如果只需要使用少數的孔可以只用一邊的，其余用蓋子蓋住，我習慣于先用右側的孔（右手加樣方便）。
操作時用幾塊玻片把板子一側墊高，不要把蓋子全打開，一般沒問題。
細胞分布不均及解決辦法
問：
細胞接種培養板，細胞總是聚集在周邊部分，該如何處理啊？
答：
請問你的細胞是如何混勻的？是滴管吹打還是振蕩培養板？如果是后者，而且是轉圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分，導致細胞中間少，四周多！
這里提供一個好辦法：在培養種板之前，把培養板放入培養箱里進行幾個小時的飽和后再取出，種入細胞時力量要輕，可采取用滴頭在培養板孔的側面慢慢加入讓細胞懸液流入板孔中，培養的細胞基本是均勻生長。記住千萬不要用振蕩器振蕩，否則你的細胞就會想你說得那樣聚積在一起。
培養板孔直徑愈小，這個現象越明顯，24、96孔板這種現象不可避免，因為液體的附壁使得孔內培養液不是成一個液平面，而是周邊高，就像凹鏡一樣，而使用這兩種孔板由于需要加干預等原因而不能加足量培養液，使得細胞隨培養液一起出現“邊集”現象，如果為了使孔中央也有均勻細胞而增加接種細胞數量的話，這要看你需要觀察何種指標，如果是MTT ，免疫組化的話會因為細胞成層而影響結果。
消化細胞時要注意吹打均勻，避免細胞成團，而且孔內培養液量要足夠，一般接種時加足量培養液，加干預時換一次液，干預液加培養液量等于接種時培養液量，這樣的話“邊集”現象會有所改觀，不妨一試。
問：
我做的是空斑形成實驗，最好是細胞鋪成均勻的一層，，可接種病毒時大部分孔都還好，個別的不太均勻。細胞組內差異很大，想請教一下大家加細胞的時候都有什么方法呀？
答：
細胞消化后吹打成單細胞懸液很關鍵！保證分板時每個孔的細胞數目是一致的！
當然還有處理因素各個孔之間的平行也很重要，比如說加藥時，藥物稀釋后混勻，保證每個孔的濃度是一致的！
再者加細胞和藥物時，要試驗組和對照組一塊輪流加，避免加樣先后順序導致細胞密度和藥物濃度的差異！
問：
吹打已經是均勻了，但是鋪板，6孔，24孔總有些不均勻，有點往中間集中。而且明明計數好了鋪，長一兩天，各個孔密度又不一樣，對檢測有影響，有良策嗎？
答：
如果用巴氏吸管鋪的話，每次吸取的量不要太多，因為吸管內的細胞會自動向下沉，往往第一開始幾個孔細胞數多，經常均勻細胞懸液，加液走S型路線。
如果用移液器的話，tips要處理下，把尖端去掉避免損傷細胞，這樣每一次取液對應一個孔。用tip一對一孔加入比較準確。但也要注意混勻懸液。
設立平行組，n要足夠大（可以計算一下）。
鋪板后不要搖，因為搖動會導致細胞向中間聚集。最好鋪板一次搞定。
