支原體形態多變，在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構．其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和細胞之間。橫斷面與細胞微絨毛相似，但微絨毛電子密度比支原體小，且中央無顆粒群或中央束。
支原體代謝需固醇類物質、部分種類需要精氨酸、氧氣、葡萄糖，每一種支原體都有自身持點。多數支原體適合于偏堿條件下生存(PH 7.6~8.0)，對酸耐受性差。對熱比較敏感，對一般抗生素不敏感。
支原體污染細胞后．培養液可不發生混濁．多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著，細微變化也可由于傳代、換液而緩解．因此易被忽視。但個別嚴重者，可致細胞增殖緩慢．甚至從培養器皿脫落。