細胞技術專題：細胞生長曲線實驗

細胞

D-Hanks液 牛血清 RPMI1640 雙抗 0.08%胰酶

凈化工作臺 離心機 恒溫水浴箱 冰箱 倒置相差顯微鏡 培養箱 吸管 培養瓶 吸頭 槍頭 24培養板 膠塞 微量加樣槍 紅血球計數板

1. 取生長狀態良好的細胞，采用一般傳代方法進行消化，制成細胞懸液。

2. 計數，精確地將細胞分別接種于21～30個大小一致的培養瓶內或培養孔（以24孔培養板為宜），每瓶或孔細胞總數要求一致，加入培養液的量也要一致。

3. 每天或每隔一天取出3瓶（孔）細胞進行計數，計算均值。培養3～5 d 常要給未計數的細胞換液。

4.  以培養時間為橫軸，細胞數為縱軸（對數），描繪在半對數座標紙上，連接成曲線后即成該細胞的生長曲線。

1.  細胞生長曲線雖然最為常用，但有時其反映數值不夠精確，可有20～30%的誤差，需結合其它指標進行分析。

2.  現在很多實驗室利用培養板采用MTT法進行生長曲線測定，較為簡便。

3.  標準的細胞生長曲線近似“S”形，一般在傳代后第一天細胞數有所減少，再經過幾天的潛伏適應期，然后進入對數生長期，達到平臺期后生長穩定，最后到達衰老。

4.  在生長曲線上細胞數量增加1倍時間稱為細胞倍增時間，可以從曲線上換算出。