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  • 發布時間:2020-09-15 09:56 原文鏈接: 細胞生長檢測方法:MTS檢測法

    1、培養IL-2依賴細胞株CTLL-2細胞或HT-2細胞(檢測IL-2),或者IL-3依賴細胞株FDC-P1細胞或FL5.12細胞(檢測 IL-3)到對數生長期。

    2、取96孔細胞培養板,每孔加0.1ml含1×104 ~2×104 上述細胞之一的DMEM培養液(加10%小牛血清)。

    3、每孔加0.1ml系列稀釋的待測細胞因子(IL-2或IL-3)樣品或細胞因子標準品,在37℃ 5% CO2 的飽和水汽二氧化碳培養箱中培養24小時。

    4、每孔加20μl MTS/PMS混合液,繼續培養3~4小時顯色。

    5、檢測前搖晃培養板10秒鐘,混勻顏色。在酶聯檢測儀上,波長570nm(或490nm,或570nm和690nm)處檢測各孔的光吸收值(OD)。用樣品稀釋度對OD值(OD570 、OD490 或OD570 /OD690 )繪制劑量-反應曲線,根據標準品曲線計算樣品中細胞因子的量。

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