細胞瞬時轉染可用于（1）觀察目的基因功能（2）表達蛋白在某種細胞中的功能（短時間即可進行觀察，但效應會很快丟失）。
| 實驗方法原理 | 通過脂質體介導轉染法及電穿孔等基因轉染技術，將靶基因導入細胞，一般在轉染后48小時左右，靶基因即可在細胞內表達。根據不同的實驗目的，48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。 |
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| 實驗材料 | 細胞樣品 |
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| 試劑、試劑盒 | FuGENE 6脂質體 |
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| 儀器、耗材 | 電穿孔 |
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| 實驗步驟 | 一般流程：
1）細胞接種：轉染實驗前天接種細胞，各種細胞的平板密度依據各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉染當天細胞密度應達到60%~80%覆蓋。
2）細胞轉染（脂質體、電穿孔、FuGENE6等）
3）48小時以后鑒定目的基因的表達情況。
前期準備：
l構建好的外源基因載體，或目的基因基本信息。
l待轉染的細胞系（1×106個細胞，可傳代，倍增時間小于48小時）以及細胞培養條件的說明。
l若需要檢測靶基因的表達，請提供相應抗體。 收起 |
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| 注意事項 | 1. 轉染48——72h后可檢測基因表達。如用于重組蛋白、抗體生產等。
2. 由于各實驗操作細節可能不同，建議轉染前可做優化實驗，確定sinofection轉染試劑與DNA的最佳比例。
3. 如果在無血清條件下轉染，使用含血清的正常生長培養基進行細胞鋪板。在加入復合物前移去生長培養基，替換為0.5ml無血清培養基。 |
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| 其他 | 在細胞中加入復合物24-72小時后，分析細胞抽提物或進行原位細胞染色，檢測報告基因活性。這依賴于細胞類型和啟動子活性。對穩定表達，在開始轉染一天后將細胞傳代至新鮮培養基中，兩天后加入篩選抗生素。進行穩定表達需要數天或數周。 |
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