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  • 發布時間:2019-04-05 13:08 原文鏈接: 細胞膜流動性測定實驗_電子自旋共振法

    實驗材料

    對數生長期腫瘤細胞

    試劑、試劑盒

    PBS游離5NSA

    儀器、耗材

    毛細管離心機離心管試管燒杯電子自旋共振儀

    膜的流動性是生物膜結構的基本特征之一,主要指膜脂肪酸鏈部分及膜蛋白的運動狀態。膜脂類分子在相變溫度以上條件下主要有側向擴散、旋轉、左右搖擺、伸縮振蕩、翻轉及異化運動等方式。

    膜蛋白的運動方式大體分為側向及旋轉運動,主要受脂質雙分子層的影響。脂肪酸不飽和鍵含量和鏈的長度明顯影響著膜脂流動性,不飽和鍵的存在會降低膜脂分子間排列的有序性,從而增加膜的流動性,短鏈能減低脂肪酸鏈尾部相互作用,在相變溫度下,不易于凝集,此外,脂肪酸烴鏈圍繞C- C鍵由全反式構型到歪扭(CAUCHE)的旋轉異構運動,也可使流動性加大。


    生物膜適宜的流動性是體現生物膜正常功能的必要條件,在一定范圍內,膜流動性增加,有利于膜中酶分子的擴散和旋轉運動,使酶活性增加。一些載體蛋白分子的運動性也取決于膜中脂類分子的流動性。

    研究發現腫瘤對化療藥物產生的耐藥性主要與細胞膜P糖蛋白過度表達谷胱甘肽及其相關酶系活性改變有關,也有許多研究表明耐藥細胞膜流動性較親代敏感細胞明顯增加。另有實驗研究發現腹水癌細胞的惡性程度隨著膜流動性的增加而增加,白血病及轉移的腫瘤細胞的膜流動性遠遠高于非轉移細胞。因此,對敏感及耐藥的腫瘤細胞膜流動性的監測有著螢要的意義。


    膜流動性的測定方法主要有熒光探針標記,電子自旋共振以及差示掃描量熱法,x線衍射,棱碰共振等


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