細胞的PFA固定實驗

細胞懸液

PFA PBS

載玻片 加濕盒 玻璃染色盤

1.  吸取濃度為2×10⁷細胞/ml 的細胞懸液10 μl，滴于多聚L-賴氨酸包被的載玻片上。置于加濕盒中，使細胞靜置30 min。 

2.  將玻片放入玻片架，浸于盛有4%PFA固定液的染色用玻璃盤中，室溫固定 20 min。

3.  將玻片架移至另一盛有3×PBS的盤中，放置2 min（此步終止PFA固定作用）。

4.  將玻片架移至一新的含1×PBS的盤中，放置2 min。換1×PBS后，再放置2 min。

5.  在盤中相繼加換50%、70%、95%、100%乙醇，在毎種溶液中放置5 min 以進行脫水。

6.  在空氣中使玻片完全干燥，放于有干燥劑的玻片盒中，-70℃存放（可存數周）。