一、自然沉降法 檢查空氣中的細菌
【材料】
普通瓊脂 平板。
【方法】
取普通瓊脂平板一個,打開皿蓋,讓培養基直接暴露于空氣中,置于實驗臺上或需要測定的地方15~30分鐘。蓋上皿蓋,用記號筆或蠟筆注明放置地點、實驗日期和實驗者班級、姓名等,放入37℃溫箱培養18~24小時,觀察細菌的生長情況和數量。并分析其意義。
二、傾注法檢查水中的細菌
【材料與方法】
2. 另取一支未接種的肉湯管做對照,與上管一起置于37℃溫箱培養18~24小時,觀察結果。
【結果】
對照管應透明清亮,試驗管變混濁,說明水樣中有活菌存在。并可通過比濁法估計細菌生長繁殖后的數量。
三、人體體表及各種物品表面的細菌檢查 — 拭子法和涂抹法
【材料】 普通瓊脂平板。
【方法】
取普通瓊脂平板一個,在平板底面用記號筆或蠟筆將平板分成若干等份,于每份培養基表面分別用手指、衣物、書本、筆等輕輕涂抹(不要擦破培養基)。也可用無菌生理鹽水擦洗衣物等,用無菌棉拭子涂于培養基表面,蓋上皿蓋,分別標記清楚。置37℃溫箱培養18~24小時觀察結果。觀察各種物品中細菌的數量及類別,并分析其意義。
【注意事項】
本實驗檢出的除細菌外,尚可能有真菌、放線菌等,請注意加以區別。
四、人咽喉部位的細菌檢查
【材料】 血液瓊脂平板。
【方法】
1. 咳碟法
取血液瓊脂平板一個,打開皿蓋,將培養基面置于口腔前約10厘米處,用力咳嗽數次(讓飛沫落在培養基表面),然后蓋上皿蓋,注明被檢查者姓名、實驗日期等。置37℃培養18~24小時觀察結果。觀察細菌的數量、種類等,注意是否有溶血環,并分析其意義。
2. 試子法
用無菌棉簽涂
取扁桃腺兩旁的分泌物,在血瓊脂平板表面涂布成線,然后改用接種環,作分區劃線接種,置37℃培養18~24小時觀察結果。觀察細菌的數量、種類等。注意是否有溶血環,并分析其意義。
五、化學因素對細菌的影響(化學消毒劑的殺菌試驗)
【材料】
菌種:葡萄球菌18~24小時瓊脂斜面培養物。
2. 培養基:普通瓊脂平板。
3. 化學消毒劑:5%石炭酸、2%碘酒、70%酒精、0.1%升汞。
4. 其他:直徑0.6cm無菌圓形濾紙片、小鑷子、接種環等。
【方法】
將瓊脂平板分為四等分,并在其底面做標記。
2. 用接種環取葡萄球菌瓊脂斜面培養物,密涂于整個瓊脂培養基表面。
3. 用小鑷子夾取無菌小濾紙片,分別蘸取上述消毒劑(消毒劑不宜蘸得過多,防止外流)。平貼于各相應分區的中央,蓋上皿蓋,標明日期和試驗者。
4. 置37℃培養18~24小時后觀察各種化學消毒劑的殺菌作用。紙片周圍無細菌生長的區域,稱為抑菌圈,分別測量四種消毒劑抑菌圈的直徑,以毫米為單位記錄之。