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  • 發布時間:2019-04-08 22:06 原文鏈接: 細菌形態學檢查實驗——芽胞染色法

    實驗方法原理芽胞(Spore)是細菌的休眠狀態,對各種理化因素有強大的抵抗力,能耐受惡劣環境的影響。芽胞折光性很強,可經特殊染色法染色后,在光學顯微鏡下觀察。本實驗要求學生了解兩種特殊染色法并認識這種細菌特殊構造。
    實驗材料

    破傷風桿菌

    試劑、試劑盒

    孔雀綠水溶液花紅水溶液鉻酸水溶液石碳酸復紅染硫酸美藍染液

    儀器、耗材

    載物玻片顯微鏡

    實驗步驟

     

    一、威-康(Wiltz-Conkln)二氏芽胞染色法
     

    1.  材料
     

    破傷風桿菌(Clostridium tetani)24 h瓊脂斜面純培養物, 3%孔雀綠水溶液, 0.5%花紅水溶液, 載物玻片。
     

    2.  方法
     

    (1)取破傷風桿菌培養物涂膜、干燥、火焰固定。
     

    (2)滴加3%孔雀綠水溶液加熱染色3~6 min,水洗。
     

    (3)0.5%花紅水溶液復染0.5~1 min,水洗,干燥,鏡檢。
     

    3.  結果觀察
     

    芽胞染成綠色,菌體染成紅色。
     

    注意芽胞的形狀、在菌體中的位置和大小(與菌體橫徑比較)。同時可能看到沒有芽胞的繁殖體和失掉菌體的芽胞。
     

    二、Moeller氏芽胞染色法
     

    經火焰固定的細菌涂片,以5%鉻酸水溶液處理2~10 min,充分水洗。用石碳酸復紅染液加熱染色1 min,水洗。用5%硫酸水短時間脫色(約5 s),立即水洗。再用美藍染液染色半分鐘,水洗,吸干,鏡檢。結果芽胞染成紅色,菌體染成藍色。

    展開


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