結締組織染色實驗——網狀纖維與膠原纖維染色

網狀纖維是網狀結締組織中的一種纖維，由交錯排列的纖細的纖維組成。由于網狀纖維由含有糖蛋白的膠原蛋白組成，這種組織蛋白質易與氨性銀結合，再選用酸性染料染色液，能夠顯示網狀纖維與膠原纖維的二種組織結構成分。常用 Gomori 銀與麗春紅-苦味酸復合染色法。

石蠟組織切片

二甲苯乙醇蒸餾水草酸硫酸鐵銨高錳酸鉀硫酸硝酸銀氫氧化鈉麗春紅 S 水溶液苦味酸飽和液中性樹膠

氨性銀溶液

甲液：硝酸銀 10.2 g，蒸餾水 100 ml。

乙液：氫氧化鈉 3.1 g，蒸餾水 100 ml。

取甲液 5 ml，滴加氨水至溶解清亮為止。再加入 5 ml 乙液，此時溶液突然變為黑色，再滴加氨水至清亮為止。補加 4 滴氨水，用蒸餾水補足 50 ml。

高錳酸鉀氧化液：高錳酸鉀 0.5 g，蒸餾水 95 ml，3％ 硫酸 5 ml。

草酸漂白液：草酸 2 g，蒸餾水 98 ml。

硫酸鐵銨液：硫酸鐵銨 2 g，蒸餾水 98 ml。

1. 石蠟組織切片，常規脫蠟至水。

2. 高錳酸鉀氧化液處理 5 min，自來水洗 1 min。

3. 草酸漂白液浸泡 2 min，自來水 1 min。

4. 硫酸鐵銨液處理 2 min，自來水洗 2 次。

5. 蒸餾水洗 2 次，氨性銀溶液處理 1 min。

6. 蒸餾水洗 2 次，20％ 甲醛液還原 3 min。

7. 蒸餾水洗 2 次，0.2％ 氯化金處理 1 min。

8. 蒸餾水洗 2 次，麗春紅-苦味酸染色液處理 3 min。

9. 無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

1. 配制氨性銀溶液必須使用干凈器皿，放在冰箱內保存，可用較長時間。

2. 高錳酸鉀氧化液存放時間不能過長，以免失去氧化效果。

3. 氨性銀染色后，不能將銀液傾去，要將蒸餾水直接倒在組織切片上輕洗。

結果：網狀纖維呈黑色，膠原纖維呈紅色，背景呈黃色。