含量測定
照高效液相色譜法(通則0512)測定。固相萃取柱的前處理、系統適用性試驗與要求取固相萃取柱1支(用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑),依次用甲醇水(3:1)15ml與水5ml沖洗,再用pH值約為9的氨水溶液(取水適量,滴加氨試液至pH值為9)沖洗至流出液pH值約為9,待用。精密量取每1ml中約含嗎啡對照品0.5mg的5%醋酸溶液0.5ml,置處理后的固相萃取柱上,以供試品溶液中相同的洗脫條件洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻,作為固相萃取柱系統適用性溶液。精密量取該溶液與對照品溶液各10l,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖。固相萃取柱系統適用性試驗結果(fs)按下列公式計算,應在0.97~1.03之間系統適用性試驗結果()=AB/C式中Ax為系統適用性溶液嗎啡峰面積;AR為對照品溶液嗎啡峰面積;Cx為系統適用性溶液濃度CR為對照品溶液濃度供試品溶液取本品約10g,研細(過五號篩),取約1g,精密稱定,置200ml量瓶中,加5%醋酸溶液適量,超聲30分鐘使嗎啡溶解,取出,放冷,用5%醋酸溶液稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液0.5ml,置處理后的固相萃取柱上,滴加氨試液適量使柱內溶液的pH值約為9(上樣前,另取同體積的續濾液預先調試,以確定滴加氨試液的量),搖勻,待溶劑滴盡后,用水20ml沖洗,以含10%甲醇的5%醋酸溶液洗脫,用5ml量瓶收集洗脫液至刻度,搖勻。對照品溶液取嗎啡對照品適量,精密稱定,加含10%甲醇的5%醋酸溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中約含50μg的溶液。色譜條件用辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以50mmo/L磷酸二氫鉀溶液-2.5 mmol/L庚烷磺酸鈉溶液乙腈(5:5:2)為流動相;檢測波長為220nm;進樣體積10l。系統適用性要求理論板數按嗎啡峰計算不低于1000測定法精密量取供試品溶液與對照品溶液,分別注入液相色譜儀,記錄色譜圖,按外標法以峰面積計算。