耐高溫DNA聚合酶的相關介紹

　　特性

　　良好的熱穩定性；

　　70℃ 2h，殘留90%活性；

　　93℃ 2h，殘留60%活性；

　　94℃ 2h，殘留40%活性。

　　5’→3’聚合酶活性，對dATP有優先聚合活性；

　　5’→3’外切酶活性；

　　無3’→5’外切酶活性。

　　用途

　　聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。

　　Taq酶擴增的PCR產物，3’末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基，而這個堿基幾乎總是A，因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性，故可用T載體克隆。

　　缺點

　　無3’→5’閱讀校正功能，在PCR擴增過程可引起錯配，30次循環錯配率約0.25%。

　　措施：選擇高保真Taq酶，如Pfu。

　　原因：Pfu具有3’→5’外切酶活性。

　　注意：Pfu擴增產物為平末端。