聚乙二醇(PEG)是一個非離子水溶性多聚體,使用 PEG 沉淀蛋甶質時,只在個別濃度下才使蛋白質稍有變性。由于 PEG 溶解時散熱低,形成沉淀的子衡時間短等特點,使它在蛋白質的組分分離以及結晶中成為一個有用的試劑。通常 PEG 終濃度達 30% 時,蛋白質就能夠達到最大量沉淀。
蛋白質溶液
聚乙二醇 6000
燒杯磁力攪拌器和攪拌子離心機和轉頭
1. 向 100 ml 蛋白質溶液中,在緩慢攪拌下加入 150 ml 50% PEG 6000(w/v 溶于蒸餾水);
2. 繼續攪拌 30~60 min,至完全沉淀為止;
3. 10 000×g 離心 10 min;
4. 除去上清;
5. 用 1~2 倍沉淀體積的緩沖液再懸浮沉淀。
1. 在等電點附近蛋白質溶解度降低。
2. 用硫酸銨沉淀法能夠除去 PEG。也可采用離子交換層析,也有報道指出高濃度 PEG 使凝膠過濾柱層析行為異常。