聚乙二醇(PEG)濃縮法及超過濾法純化病毒實驗1

待純化的病毒

聚乙二醇

燒杯透析袋（可選）

操作方法有以下三種。

1. 直接加入法 當只有少量的病毒懸液時采用此法。在病毒懸液中加入 8%~10% 的PEG攪勻使病毒沉淀。此法須以密度梯度離心法去除病毒沉淀物中的 PEG 。

2. 液體濃縮法 ①用超聲波或凍融的方法使細胞破碎釋放病毒，3 000 r/min 離心 30 min,除去細胞碎片；②緩慢攪動并加入 NaCl , 使最終濃度為 0. 5mol/L NaCl , 再加人等量的 PEG,4℃過夜；③8 000r/min 離心 30 min, 收集病毒沉淀；在病毒沉淀中加入適量的PBS 緩沖液， 4℃過夜； 10 000r/min 離心 1 h。③必要時可用梯度離心或其他方法進一步純化。分離大量病毒宜用此法。

3. 固體濃縮法 將欲濃縮的病毒懸液約 100 ml 置于透析袋內，必須扎緊透析袋口，放入適量的 PEG 固體，置 4℃約 24 h 即可將病毒懸液濃縮至 10 ml 左右。此法透析袋內的鹽分隨液體一起透析出，濃縮后懸液的鹽分不升高。