1、PCR擴增體系問題。用其他正在進行的且擴增正常的模板和引物證明PCR擴增體系沒有問題,即PCR反應混合物、水、取液器、PCR儀、操作等都是好的(陽性對照)
2、引物問題。用以前擴增產物做模板(稀釋50倍),證明引物沒有問題
3、只是模板問題了。因為樣本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是樣本中的抑制物過多(新鮮時沒有溶出來)。