實驗材料 平滑肌、骨骼肌、心肌
儀器、耗材 載玻片蓋玻片脫脂棉刺血針油鏡用油顯微鏡。
實驗步驟
平滑肌
(一)平滑肌分離裝片(H-E染色)的觀察
1.低倍鏡觀察 先用低倍鏡尋找,找到平滑肌后換用高倍鏡
2.高倍鏡觀察 可見平滑肌纖維的整體形態。平滑肌纖維為長梭形,胞核長橢圓形,位于細胞的中部。在常規染色標本上肌原纖維分辨不清楚。
(二)貓小腸橫切片(H一E染色)的觀察
1.肉眼觀察 在小腸壁找到染色較紅的小腸壁的肌層
2.低倍鏡觀察 觀察肌層可見到平滑肌縱、橫切面的兩個層次:縱切面平滑而呈梭形;橫切面呈大小不等、不規則的圓形。
3.高倍鏡觀察 注意比較縱切面和橫切面上結構的差異
(l)縱切面 平滑肌纖維為梭形,胞核長橢圓形或桿狀,被染成深藍紫色,其寬度兒乎等于平滑肌纖維的寬度。胞質染成紅色。
(2)橫切面 可見到許多染成藍紫色圓形的胞核,其周圍包有染成紅色的胞質,這便是切到平滑肌纖維中擁有胞核部分的橫切面。另外,還可見到大小不等的、僅有紅色胞質的平滑肌纖維的橫切面,這是因為沒有切到胞核的緣故。
骨骼肌
(一)貓骨骼肌縱、橫切片(鐵蘇木精染色)的觀察
掌握骨骼肌纖維的一般形態(胞核的位置及明暗相間的橫紋)
1.低倍鏡觀察 找到縱切(肌纖維長條形)及橫切(肌纖維多邊形)的肌纖維〔在肌纖維間有一結締組織。
2.高倍鏡觀察 注意比較縱、橫切面上結構的差異。
(1)縱切面 肌纖維長條形,外為肌膜,緊貼肌膜內方,有許多染成藍紫色的卵圓形胞核肌原纖維沿著肌纖維長軸排列,有明顯的橫紋,染色深的為A帶,染色淺的為I帶。若切片染色較好,還可看到I帶內的Z線和A帶內的H帶(最好用油鏡觀察)。
(2)橫切面 肌纖維呈多邊形或不規則圓形,外有肌膜,卵圓形的胞核緊貼肌膜內側。肌原纖維呈小藍點狀,在肌質內排列不均勻,所以在橫切面上呈現出肌原纖維的小區。
(二)示范觀察收縮狀態與舒張狀態的骨骼肌纖維的透射電鏡圖片
注意觀察粗肌絲和細肌絲的分布。收縮時肌節的變化及其變化出現在哪一帶?哺乳動物的橫小管位于何處?
心肌
取猴或狗心肌切片(鐵蘇木精染色)觀察。
(一)低倍鏡觀察
作心肌切片宜取心室肌為材料,由于心室肌分多層,所以在切片上可看到縱、橫、斜等切面。縱切面心肌纖維為有分支的帶狀,橫切面心肌纖維為不規則的圓形。
(二)高倍鏡觀察
在縱切面上,心肌纖維彼此分支吻合成網狀。胞核卵圓形,位于纖維中央,把顯微鏡的虹彩光圈縮小,光線放暗一些,可見到心肌纖維的橫紋,但不如骨骼肌纖維明顯。在肌纖維及其分支上可見染色呈深藍色的梯形橫線,即為閏盤。肌纖維之間有結締組織及血管。
在橫切面上,心肌纖維為不規則的圓形。有的有胞核,有的無胞核,這是由于切片切到或沒切到胞核的緣故。