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  • 發布時間:2022-09-14 10:49 原文鏈接: 胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法

    方法名稱: 胃蛋白酶的測定—胃蛋白酶測定法

    應用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價。

    本方法適用于胃蛋白酶。

    方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價。

    試劑: 1. 血紅蛋白試液

    2. 三氟醋酸溶液

    3. 鹽酸溶液

    儀器設備: 可見分光光度計

    試樣制備: 1. 供試品溶液的制備

    精密稱取本品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,作為供試品溶液。

    2. 對照品溶液的制備

    精密稱取酪氨酸對照品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。

    注:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

    操作步驟: 1.供試品的測定

    取大小相同的試管6支,其中3支精密加入對照品溶液1mL,另3支精密加入供試品溶液1mL,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5分鐘,精密加入預熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5mL,搖勻,并準確計時,在37℃±0.5℃水浴中反應10分鐘,立即精密加入5%三氟醋酸溶液5mL,搖勻,濾過,取續濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5mL,置37℃±0.5℃水浴中保溫10分鐘,再精密加入5%三氟醋酸溶液5mL,其中一支加供試品溶液1mL,另一支加上述鹽酸溶液1mL,搖勻,濾過,取續濾液,分別作為供試品和對照品的空白對照,照紫外-可見分光光度法,在275nm的波長處測定吸光度,按下列公式計算,即得。

    參考文獻: 中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業出版社,2005年版,二部,p.389。


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