從胰島β細胞分泌的胰島素大部分在肝腎滅活，其中約40%～50%經門靜脈入肝滅活，因此肝腎功能狀態，尤其是肝功能情況是影響循環血中胰島素含量的重要因素；糖尿病患者在使用胰島素，尤其是動物胰島素后，體內常產生胰島素抗抗體，由于胰島素與胰島素抗抗體可產生高度免疫反應，故可影響血漿胰島胰島素的測定。另外，血液中胰島素原、前胰島素原含量以及垂體前葉、腎上腺皮質、甲狀腺亢進等內分泌系統疾病，噻嗪類利尿劑、糖皮質激素等多種藥物以及感染、發熱、手術等應激狀態都是影響胰島素測定的常見因素。
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