胼胝體染色

實驗概要

本實驗介紹了植物葉片胼胝體染色的基本方法。

主要試劑

50uM雌激素，40uMf1g22，脫色液(水:甘油:乳酸:水飽和酚:酒精==1:1:1:1:8)，50%酒精，染色液(150 mM K₂HPO₄，pH9.5，0.01% aniline blue)

主要設備

熒光顯微鏡，Image J軟件，注射器，載玻片

實驗材料

植物葉片

實驗步驟

1. 挑選5-6周大的植物葉片在50uM的雌激素或者水誘導12小時后注射40uMf1g22或者水。

2. 12小時后取下葉片，浸泡于脫色液(水:甘油:乳酸:水飽和酚:酒精==1:1:1:1:8)中。

3. 抽真空15分鐘。

4. 65℃放置30-45分鐘直到葉片透明。

5. 分別用50%酒精和水漂洗一次。

6. 置于染色液(150 mM K₂HPO₄，pH9.5，0.01% aniline blue)中染色45分鐘。

7. 取出葉片置于載玻片上，在熒光顯微鏡下的紫外激發光下照相。

8. 用Image J軟件(http: //www. uhnresearch. ca/wcif)對0.1 mm²葉片而積內的胼胝體計數。