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  • 發布時間:2020-08-17 18:00 原文鏈接: 脊髓損傷后的運動功能學評價實驗

    實驗方法原理 運動行為是動物最基本的行為表現,除了被用于評價藥物、創傷對動物運動功能恢復的影響,也可用千對轉基因或基因敲除動物表型的鑒定。脊髓損傷后可出現與損傷節段相應的各種行為、感覺和括約肌功能障礙,肌張力異常以及病理反射等改變。動物實驗研究中多采用頸胸段脊髓損傷模型來模擬臨床上截癱患者,其預后依賴于損傷節段、損傷類型、損傷程度以及損傷后恢復的時間。針對不同脊髓損傷動物模型造成的不同解剖結構損傷以及相應的行為學改變,完整、客觀的運動功能評價系統對損傷后的修復療效評定具有重要的意義。目前脊髓動物損傷模型的運動功能評價方法可大致分為曠場試驗(open field test)、非開放場地試驗(non-open field test)和聯合行為學評分法(combined behavioral score)3類。曠場試驗Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)法和Basso-Mouse-Scale(BMS)法是目前應用最為廣泛的方法,是在Tarlov法的基礎上建立起來的一種新的神經運動功能評價方法,具有與脊髓損傷程度良好的相關性。非開放場地試驗中包括的步態分析法、網格爬行試驗、平衡木行走試驗、胸腰高度試驗、斜板試驗、肢體肌力試驗等也被廣泛使用,用來反映大鼠脊髓損傷后后肢負重能力、控制后肢放置能力、后肢肌力大小以及前后肢運動協調等行為學改變。聯合評價法是Gale等在Tarlov法與斜板法結合的基礎上增加感覺、反射等一些指標建立起來的,包括后肢運動、斜板試驗、伸趾、回縮反應、熱板試驗和游泳等7項,能較準確的綜合評定脊髓損傷后大鼠運動、感覺等多方面神經功能。BBB評分;適用于對大鼠運動功能的評定,可以確定從損傷初期到后期運動功能的恢復和差異變化,甚至一些精細運動的改變,如鼠尾的下垂或上翹等。

    實驗材料 實驗動物

    儀器、耗材 四周封閉的敞箱錄像機

    實驗步驟

    ①手術前1d將正常大鼠放入曠場內熟悉環境;②手術后第1天開始進行BBB評分,大鼠BBB評分觀察期為4min; ③可用錄像機錄下視頻后用電腦分析,也可在熟練掌握該評分細則后立即給分。


    (3)結果分析BBB評分表是根據觀察脊髓損傷大鼠經過三個階段的恢復而建立的,共21分。三個階段為:①早期以無或極少的后肢關節運動為特征;②中期包括幾次共濟失調步態;③晚期包括精細運動,如拖著腳趾和尾巴,軀干不穩定以及爪子交替輪轉。


    評分項目為:①0分,未見后肢運動;②1分;一個或兩個關節的輕微運動,通常是髖關節和/或膝關節;③2分一個關節的廣泛運動或一個關節的廣泛運動加上其他關節的微運動;④3分兩個關節的廣泛運動;⑤4分后肢三個關節的輕微運動(髖關節,膝關節和踝關節);⑥5分兩個關節的輕微運動和另一個關節的廣泛運動;⑦6分兩個關節的廣泛運動和另一個關節的輕微運動;⑧7分后肢三個關節的廣泛運動;⑨8分無負重拖動或足置于無;⑩9分足底僅位于負重位,或偶爾/頻繁/持續的,無足底步行;?10分偶爾負重步行,無前后肢協調運動;?11分頻繁到持續的負重步行,無前后肢協調運動;?12分頻繁到持續的負重步行,偶有前后肢協調運動;?13分持續的負重步行,頻繁的前后肢協調運動;?14分持續協調步態,持續前后肢運動協調,運動時優勢爪旋轉或頻繁,持續前后肢運動協調和偶爾的足背步行;?15分持續協調步態,當前肢前進時無或偶有伸趾,優勢爪剛觸地時與身體平行;?16分持續協調步態,頻繁伸趾,觸地時與身體平行,提起時旋轉;?17分持續協調步態,頻繁伸趾,優勢爪在觸地及提起時均與身體平行;?18分待續協調步態,持續伸趾,優勢爪在觸地與身體平行,提起時旋轉;?19分持續協調步態,持續伸趾,優勢爪在觸地及提起時均與身體平行;21.20分持續協調步態,待續伸趾,優勢爪在觸地及提起時均與身體平行,但軀體不穩定,尾巴持續上翹;22.21分持續協調步態,持續伸趾,優勢爪在觸地及提起時均與身體平行,軀體穩定。


    注意事項

    其他

    BBB評分的高低代表了大鼠脊髓損傷后后肢運動功能恢復的狀態,分值越高,恢復越好,至21分時即與正常動物相當。其中0-7分屬于恢復的早期階段,動物無力支撐自身體重,以至于拖著軀干、后腿和臀部;8-13分進入了恢復的中期,動物可以行走以及支撐自身體重,前后肢協調運動開始恢復;14-21分階段大鼠一些精細運動開始恢復。


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