臍血臍帶中干細胞分離實驗

實驗方法原理

實驗材料 臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)

試劑、試劑盒 滅菌起始培養基擴增培養基0.05%的胰蛋白酶含EDTAPBSA

儀器、耗材 T25培養瓶

實驗步驟

(a)制備和分離臍帶血來源的MNCs(CB-MNCs)。

(b)如果使用凍存的CB-MNCs,復蘇的細胞可以用于培養，不需要其他分離步驟。

(c)用起始培養基按5×106?7×106個細胞/mL濃度接種到T25的培養瓶中。

(d)將細胞在37℃，5% CO2的條件下培養，2?4周內每周一次更換培養基和細胞因子。

(e)形成USSC集落后，在擴增培養基中擴增細胞。

(f)將細胞在37℃,5% CO2的條件下培養。

(g)到達80%匯合后，用0.05%胰蛋白酶/EDTA消化細胞，并按1:3比例傳代，在相同培養條件下繼續培養。

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