腺苷三磷酸酶的測定實驗

ATP → ADP＋P_i

很多 ATP 酶是與膜組分聯系在一起的酶，比如氧化磷酸化或離子轉運系統。在細胞勻漿中或膜懸浮物中必須測定它們的不溶性。

酶樣品

TES-TrisATPMgCl2BSA 溶液十二烷基硫酸鈉

在 37 ℃ 下輕輕地振蕩培養 1 ml 含有 5～20 ul 膜懸浮物樣品的實驗混合物，并在一定的時間內（1 min、5 min、10 min，取決于酶活力）停止振蕩加入 1 ml SDS 溶液。無機磷酸的生成量根據磷酸定量方法來測定，用 1 min 生成的磷酸的物質的量（umol）來計算酶活力。

試劑：

0.1 mol/L TES-Tris，pH 7.5［N-tris（羥甲基）甲基-2-氨乙基磺酸，Mr＝229.3；3.44 g 溶于 100 ml，用 0.2 mol/L 的tris（羥甲基）氨基甲烷（Tris，4.84 g 溶于 200 ml）調節 pH 到 7.5，到 200 ml］

0.1 mmol/L ATP（二鈉鹽，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mmol/L MgCl₂（MgCl₂·6H₂O，Mr＝203.3；203 g 溶于 10 ml 水中）

BSA 溶液，100 mg 溶于 100 ml

10％（質量濃度）十二烷基硫酸鈉（SDS）