2. 溶液的組成
(1) 電極液:根據記錄的電流不同電極液的成分也不同。基本要求是等張的KCI 溶液,Ca2+ 濃度為10~100nmol (pCa 7~8),pH 值7~7.4。這里介紹一個在全細胞記錄模式時,通過改變保持電位,能分別記錄到Na+、K+、Ca2+ 電流的電極液成分(mmol/L):K Aspartic 49.89,KCI 30.37, KH2PO4 25,HEPES 20.12,EGTA 0.999,KOH 29.95,MgCI2 1,CaCI2 0.2,ATPNa2 6.8。用KOH 調pH 至7.4。如果要記錄純的Na+、K+、Ca2+ 電流,則需要使用相應的工具藥。
HEPES(N-2-hydroxyethyopiperazine-N’-2-ethanesulfonic acid,羥乙基哌嗪乙烷磺酸)
(2) 細胞外液(浴槽液):分離細胞和記錄電流時應用。分離神經細胞主要用人工腦脊液(artificial cerebrospinal fluid solution,ACSF),成分(mmol/L):NaCI 124,KCI 2.5,NaH2PO4 1.25,MgSO4 2.0,CaCI2 2,NaHCO3 26,glucose 10。該液體需要通以95%O2+5%CO2 混合氣體。如果用HEPES 作緩沖系,則ACSF 的成分如下(mmol/L):NaCI 140,KCI 2.5,MgCI2 1,CaCI2 1,glucose 25,HEPES 10。
上述溶液的配制均使用去離子水。