一、自身免疫檢測背景
自身免疫性疾病（AID）泛指機體免疫效應細胞或免疫效應分子針對自身組織或細胞產生病理性免疫應答反應，由自身免疫反應參與發病機制，導至組織損傷或功能障礙的疾病。近年來，由于人類對AID認識的提高，加之臨床經驗的積累和實驗室診斷技術的進步，AID發病率明顯上升，其總體發病率占世界人口的3%-5%。而伴隨著對AID的進一步認識，我國AID的發病率及患病率也呈現快速遞增態勢。常見的分類按自身抗原分布范圍，分為器官特異性（或局限性）AID和系統性（或器官非特異性、全身性）AID。AID發病范圍幾乎可累及人體的各系統、組織和器官，且涉及臨床各專業學科。因此AID已成為嚴重影響人類健康的疾病。AID的診斷主要依靠臨床表現、實驗室檢查、組織病理學和影像學檢查。在實驗室檢查中，自身抗體檢測對AID診斷和鑒別診斷至關重要，自身抗體已成為AID的最重要特征。
由于自身抗體檢測是AID診治中的重要工具，隨著早期診斷、規范化治療的開展，自身抗體檢測在疾病診斷、監測及預后評估中發揮的作用也受到更多重視。但是，由于目前自身抗體檢測缺乏統一的標準化檢驗方法，加上工作條件、傳統診療習慣、結果判讀以及醫療保險限制等方面的因素影響,導至自身抗體檢測在臨床應用上存在著不統一、不規范現象。近十年國內自身抗體質控結果及近期全國多中心實驗室調查的數據顯示，部分自身抗體檢測的開展率及正確率并不理想,自身抗體檢測的方法也很不統一。同時,在自身抗體結果解讀方面也存在著誤差或誤判。自身抗體檢測標準化、統一化及自動化是未來趨勢，如何標準化以及正確解讀是我們面臨的挑戰。
二、自身抗體檢測的自動化及標準化
目前國內開展自身抗體檢測尚無統一標準：自身抗體種類數量繁多，國外臨床常規檢測已達上百種，而國內常規開展只有幾十種甚至十幾種，手工操作比重大，自動化程度低，不同自身抗體沒有采用相應的國際標準中推薦的檢測技術，定性檢測多，定量檢測少，質量管理較差，準確性程度低，實驗室出結果慢，這都給臨床對于自身免疫疾病診斷帶來了困擾，因此涵蓋多種自身抗體檢測技術的自動化平臺變得尤為重要。自動化的解決方案不僅能夠減少人為操作帶來的誤差，能夠提升實驗室檢測效率，更為重要的是能夠實現自身抗體嚴格意義的定量檢測及判讀標準化。
（1）酶聯免疫吸附測定（ELISA）是將抗原抗體免疫反應的特異性和酶的高效催化作用原理有機地結合起來，在絕大多數自身抗體定量檢測中得到廣泛應用。間接免疫熒光檢測（IFA）是用特異性的抗體與切片中的抗原結合后，繼用間接熒光抗體，與前面的抗原抗體復合物結合，形成抗原抗體熒光復合物。在熒光顯微鏡下，根據復合物的發光情況來確定所檢測的抗原。此種方法學多用于自身抗體的篩查性檢測，如抗核抗體ANA，抗中性粒細胞胞質抗體ANCA，綠蠅短膜蟲dsDNA，動物組織片等，IFA是此類篩查性抗體檢測的金標準。
兩種檢測方法是目前自身抗體檢測最常用的檢測手段，但是由于國內技術水平的限制，多數實驗室仍舊采用人工處理操作，雖然操作者都受過專業化的基礎知識和動手能力的培訓。但在實際操作過程中，由于各種因素的存在都對檢測結果產生影響，如ELISA手工操作，必經過8個步驟，樣本手動保存、試劑準備、加樣、保溫、洗滌、顯色、比色、結果判定與報告，如果其中任一步驟操作不當都會影響檢測結果。全自動酶免熒光免疫分析一體機能夠同時實現自身抗體酶免及熒光檢測兩種技術平臺的自動化檢測，并能夠消除人為操作的誤差及主觀因素。
圖1. 自身免疫全自動集成檢測系統中的全自動酶免熒光免疫分析一體機
（2）IFA檢測技術中的熒光核型判讀及滴度確定歷來是檢驗人員最為頭疼的話題，一個合格的熒光判讀人員需要有至少2-3年以上的閱片經驗，據文獻報導，即使是兩名具有多年經驗的閱片人員，其對相同熒光片判讀的結果還有20%-30%的差異，可見如何客觀及準確獲得熒光判讀的結果是提升自身抗體檢測標準化的關鍵。采用3D數學建模分析技術能夠利用當前的高科技手段針對不同的熒光核型形成獨特的3D建模公式，利用此公式可快速計算未知樣本核型的結果，是目前全球最先進應用于熒光標準化判讀的技術。
圖2. 斑點型及均質型3D數學建模
圖3. 核仁型及核點型3D數學建模
圖4. 自身免疫全自動集成檢測系統中的全自動免疫熒光顯微鏡