色譜的分離度是怎么回事

又稱分辨率,為了判斷分離物質對色譜柱在色譜柱中的分離情況,常用分離度作為柱的總分離效能指標.用R表示.R等于相鄰色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比.
　　resolution,R
　　相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值.也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度.R越大,表明相鄰兩組分分離越好.一般說當R＜1時,兩峰有部分重疊；當R=1.0時,分離度可達98%；當R=1.5時,分離度可達99.7%.通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標志.當R＝1時,稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內側峰基重疊約2%.R＝1.5時,稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%.R≥1.5稱為完全分離.《中國藥典》規定R應大于1.5.
　　分離度計算公式：R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)
影響它的因素主要有以下幾個：
1、柱子的長短與填料的粒徑.柱子越長所裝填料也越多,表面積也越大,吸附力也越大,所以分離能力也就高.同樣同等長度的柱子粒徑越細的,表面積也就越大,分離也就越好.
2、流動相（考慮反相條件下）：
a：水相與有機相比例的大小,有機相高洗脫力強,組份在流動員相中分配的多,填料對其吸附能力弱,因此分離能力也就低.
b、不同溶劑的選擇：拿甲醇和乙腈來說,它們倆的分離選擇能力就不同.乙腈是非質子性,甲醇是質子性.所以當（甲醇）乙腈分離不好是,可以考慮一下乙腈（甲醇）.
3、溫度：溫度高傳質阻力會低,同樣柱壓力也會低,因此會使保留時間縮短,對分離有一定影響（只要溫度不是偏離室溫很大,對分離的影響不是很大）
4、流動的PH值.在分離一些酸、堿物質的時候,PH對分離的影響是很大的,有的會影響到出峰的順序.因為在不同的PH下它們的解離狀態會不同,因此會造就填料對它們的吸附能力改變.
5、離子對的添加（分離酸、堿化合物時）,烷基銨鹽類在PH=7.5時與強酸和弱酸形成離子對具有緩沖抑制弱堿作用.烷基磺酸鹽在PH=3.5條件下與強堿和弱堿形成離子對,并緩沖抑制弱酸離子.