艾滋病常見的幾種篩查試驗的探討

實驗室檢測是作為是否感染艾滋病的最重要的依據，所以艾滋病的檢測，在疾病的判斷治療中，顯得尤為重要，而艾滋病的檢測方法，分為很多種，下面就各種艾滋病篩查的檢測方法適用范圍及特點，和大家一起探討一下。

一、檢測的樣本

HIV感染的常用檢測標志物為：抗體HIV-1/2,抗原P24以及HIV的RNA。艾滋病檢測最常用的樣品有血液，包括血清、血漿和全血以及濾紙干血斑，唾液或尿液有時也可作為測試樣品。

不同的標志物，在體內產生的時間不同，所以要選用合適的標志物，以便準確確定感染的情況。
 

二、檢測方法

艾滋病的檢測分為篩查試驗和補充試驗。

篩查試驗包括酶聯免疫吸附試驗（ELISA），化學發光或免疫熒光試驗（CIA/IFA），快速檢測（RT）及其它試驗，

補充試驗包括確診試驗及核酸試驗，在2015年《全國艾滋病檢測技術規范》中，將核酸試驗也納入到后期的補充試驗中，以對篩查陽性的樣品進行進一步的檢測，其中確證試驗主要包括免疫印跡試驗（WB），條帶/線性免疫試驗（RIBA/LIA）。核酸試驗包括核酸定性和核酸定量試驗。

1、酶聯免疫試驗（ELISA）

ELISA有幾種類型，主要為雙抗原夾心法測抗體，雙抗體夾心法測抗原，間接法測抗體，競爭法、捕獲包被法。

試驗可使用血液（包含血清、血漿和濾紙干血斑）、尿液樣品，多為HIV抗體檢測試劑，HIV抗原抗體聯合檢測試劑可同時檢測血液中HIV-1P24抗原和HIV-1/2抗體，HIV抗原/抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶標記的HIV抗原/抗體，加底物顯色，用酶標儀測定結果。
 

2、化學發光或免疫熒光試驗（CIA/IFA）

試驗采用發光或熒光底物，可使用血液(包含血清和血漿)、尿液樣品，既可

檢測抗體，也可聯合檢測抗原抗體。HIV抗原/抗體包被于固相載體，加入待檢樣品和酶或熒光標記的HIV抗原/抗體，加發光或熒光底物，用發光或熒光儀測定結果。

3、快速檢測（RT）

快速檢測作為一種方便的方法，現在越來越多的應用于實際工作及個人的自測中，這種試驗操作簡便快速，適用于應急檢測、門診、急診檢測、VCT及檢測點等，有著不可替代的優勢。常用的類型為明膠顆粒凝集試驗（PA），免疫滲濾試驗（膠體金或膠體硒），免疫層析試驗，。

明膠顆粒凝集試驗（PA）：將重組HIV-1抗原(HIV-1/gp41和HIV-1/P24)和HIV-2抗原（HIV-2/gp36)包被在人工載體明膠粒子上，這些致敏粒子和血中的HIV-1抗體或HIV-2抗體發生凝集反應，由此可以檢測出血清和血漿中的HIV-1/2的抗體。

免疫滲濾試驗：斑點免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗：均以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原點狀或線狀固定在膜上，加待檢樣品，利用微孔濾膜的可濾過性，使抗原抗體反應。陽性結果在膜上抗原部位顯示出有色斑點或條帶，有效試驗的質控點必須顯色，反應時間在10分鐘以內。

免疫層析試驗：以硝酸纖維膜為載體，HIV抗原線狀固定在膜上，待檢樣品沿著固相載體遷移，陽性結果在膜上抗原部位顯示出有色條帶，有效試驗的質控帶必須顯色，反應時間在30分鐘以內。
 

三、檢測試劑

在試驗中，經常說到的是檢測試劑為三代或四代之類的，這個艾滋病檢測的試劑已經從第一代發展到第四代，目前基本上大都是使用三、四代的試劑，下面以ELISA試劑為例做個具體的說明。

第一代HIV診斷試劑原理為間接ELISA法，所用的包被抗原為體外培養的HIV裂解物，含有很多雜抗原，主要的HIV結構和表達的蛋白濃度不能保證，靈敏度和特異性都不高，會出現很多的假陰性和假陽性。

第二代使用的是基因重組和合成多肽抗原，利用間接ELISA原理，窗口期比第一代縮短20天，靈敏度和特異性有所提高，可以同時檢測HIV-1/2抗體。

第三代利用雙抗原夾心法檢測標本中的抗體，酶標記物改為特異性HIV抗原，檢測HIV-1/2抗體。

第四代試劑是一種HIV-1/2抗體及P24抗原的聯合檢測方法。
 

四、篩查報告及流程

HIV抗體篩查試驗報告使用格式化的HIV抗體篩查檢測報告。篩查試驗無反應報告為“HIV抗體陰性”；有反應必須進行復檢，復檢兩次檢測均無反應報告為“HIV抗體陰性”，復檢檢測均有反應或一個有反應一個無反應需進行“補充試驗”；報告為“HIV感染待確定”，不能出具陽性報告。