取新鮮未開的花蕾用自來水沖洗10分鐘，用75%的酒精消毒10-15分鐘，無菌水沖洗2次，再用10%漂白粉上清液浸泡20分鐘，無菌水沖洗3-4次。然后將花藥放到加有基本培養基的小燒杯中，用注射器的內管在燒杯的壁上擠壓花藥，使花粉從花藥中釋放出來。用尼龍篩過濾掉藥壁組濾液再經低速離心（100-160r/min)，上面的碎片可用吸管吸掉，再加入新鮮培養基。連續進行兩次過濾，到每毫升含103-104個花粉的濃度就可以了。
簡單的方法是花粉從花藥中擠出后，用鑷子取出花粉空殼，放在培養基上培養。此法適于微室栽培，但往往有藥壁等體細胞混入。