熒光偏振免疫分析的作用

熒光偏振免疫分析，是一種定量免疫分析技術，其基本原理是熒光物質經單一平面的藍偏振光(485nm)照射后，吸收光能躍入激發態，隨后回復至基態，并發出單一平面的偏振熒光(525nm)。適宜檢測小至中等分子物質，常用于藥物、激素的測定。熒光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，FPIA)是一種定量免疫分析技術，其基本原理是熒光物質經單一平面的藍偏振光(485nm)照射后，吸收光能躍入激發態，隨后回復至基態，并發出單一平面的偏振熒光(525nm)。偏振熒光的強弱程度與熒光分子的大小呈正相關，與其受激發時轉動的速度呈反相關。FPIA最適宜檢測小至中等分子物質，常用于藥物、激素的測定。熒光偏振免疫分析常用于測定半抗原的藥物濃度。反應系統內除待測抗原外，同時加入一定量用熒光素標記的小分子抗原，使二者與有限量的特異性大分子抗體競爭結合。當待測抗原濃度高時，經過競爭反應，大部分抗體被其結合，而熒光素標記的抗原多呈游離的小分子狀態。由于其分子小，在液相中轉動速度較快，測量到的熒光偏振程度也較低。反之，如果待測抗原濃度低時，大部分熒光素標記抗原與抗體結合，形成大分子的抗原抗體復合物，此時檢測到的熒光偏振程度也較高。熒光偏振程度與待測抗原濃度呈反比關系。我們測定待測抗原標準品后制標準曲線。通過檢測反應系中偏振光的大小，從標準曲線上可以精確地得知樣品中待測抗原的相應含量。