任何熒光物質都具有激發光譜和發射光譜。由于斯托克斯位移,熒光發射波長總是大于激發波長。并且,由于處于基態和激發態的振動能級幾乎具有相同的間隔,分子和軌道的對稱性都沒有改變,熒光化合物的熒光發射光譜和激光譜形式呈大同小異的"鏡象對稱"關系。
熒光激發光譜是通過測量熒光體的發光通量隨波長變化而獲得的光譜。它是熒光強度對激發波長的關系曲線,它可以反映不同波長激發光引起熒光的相對效率;熒光發射光譜是當熒光物質在固定的激發光源照射后所產生的分子熒光,它是熒光強度對發射波長的關系曲線。它表示在所發射的熒光中各種波長組分的相對強度。由于各種不同的熒光物質有它們各自特定的熒光發射波長值,所以,可用它來鑒別各種熒光物質。
可以依據繪制其激發光譜曲線時所采用的最大激發波長值來確定某熒光物質的分子熒光波長值和繪制熒光光譜曲線。同一熒光物質的分子熒光發射光譜曲線的波長范圍不因它的激發波長值的改變而位移。由于這一熒光特性,如果固定熒光最大發射波長(λem),然后改變激發波長(λex),并以縱坐標為熒光強度,橫坐標為激發光波長繪圖即獲得激發光譜曲線,從中能確定最大激發波長(λex)。反之,固定最大激發光波波長值,測定不同發射波長時的熒光強度,即得熒光發射光譜曲線和最大熒光發射波長。
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